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HIV-1感染者における新しいLD78遺伝子ファミリーの部分欠損の解析

HIV-1感染者LD78基因家族新的部分缺失分析

基本信息

批准号：
10180220
负责人：
小原健志
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10180220/
关键词：
HIV-1 ケモカイン LD78

项目摘要

ヒト末梢血単球より抽出したDNAを用い、LD78遺伝子(2264BP)をPCRにより増幅し、TAクローニングベクターを用いてサブクローニングしMsp1などの制限酵素で分類し、塩基配列を全て決定したところ、LD78遺伝子ファミリーの遺伝子は10個以上の遺伝子群でありLD78遺伝子と93%から98%の相同性を持つことが明かになった。93アミノ酸残基中21、22、25、62、70番目のアミノ酸残基が異なることが明らかになった。21番目と22番目のアミノ酸残基をもとにLD78-A群及びLD78-B群に分類した。21番目と22番目のアミノ酸残基をコードする部位にAvaII及びScrFIを制限酵素切断部位がLD78-Bでは存在するがLD78Aでは存在しないことを利用して、PCR-RFLPを用いて相対的量を算出した。進行者では、LD78-B群が優位であり、長期非進行者では、LD78-A群が優位であることが明らかになった。LD78-A群、LD78-B群の蛋白を酵母で発現させ機能を比較したところ、LD78-B群は、LD78-A群の蛋白より、抗ウイルス活性が強いことが明らかになった。また、CCR5をdown-regulationする作用も約20倍強いことが明らかになった。一方では、IL-1,TNF-aを誘導する作用があり、炎症誘導とHIV-1複製抑制という相反する性質をもつ、LD78-B群の増幅は、むしろ炎症誘導に伴う有害な影響が強く出ていると思われる。

DNA was extracted from the peripheral blood sphere and the LD78 gene (2264BP) was amplified by PCR. The restriction enzyme was classified and the nucleotide sequence was completely determined. The LD78 gene was isolated from more than 10 gene subgroups. The LD78 gene was 93% identical to the Msp1 gene. 93 amino acid residues 21, 22, 25, 62, 70 amino acid residues are different. 21 and 22 amino acid residues are classified into LD78-A and LD78-B groups. In addition, the amount of the restriction enzyme cleavage site LD78-B, LD78-A and PCR-RFLP was calculated. The progressor, LD78-B group The protein expression and anti-protein activity of LD78-A and LD78-B groups were compared. CCR5 down-regulation is about 20 times stronger than CCR5 down-regulation. On the one hand, IL-1 and TNF-a induce inflammation, inhibit HIV-1 replication, and inhibit the reverse nature of LD78-B. On the other hand, LD78-B induces inflammation, with harmful effects.