Creation of Transgenic Mice of Dialysis-Related Amyloidosis

透析相关淀粉样变性转基因小鼠的创建

• 批准号: 10670990
• 负责人: MARUYAMA Hiroki
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: NIIGATA UNIVERSITY
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10670990/
• 关键词: transgenic mice; human β_2-microglobulin; CAG promoter; dialysis-related amyloidsis; 透析アミロイド-シス; CAGベクター

To clarify the pathogenesis and establish therapy of dialysis-related amyloidosis, , we cloned humanβ_2-M cDNA by RT-PCR.We inserted humanβ_2-M cDNA into unique XhoI site of pCAGGS.We generated transgenic mice overexpressing humanβ_2-M (F0 5 lines). We confirmed humanβ_2-MmRNA by RT-PCR and northern blotting analysis, serum and urine humanβ_2-M by western blotting. We generated homozygote transgenic mice by mating F1. Serum humanβ_2-M levels (20-30mg/l)were as high as those levels in hemodialyzed patients. We could not observe dialysis-related amyloidosis in transgenic mice. These results demonstrated that only hyper β_2-M could not cause dialysis-related amyloidosis. We observe dialysis-related amyloidosis patients with chronic renal failure. To add a crucial factor, chronic renal failure, for development of dialysisrelated amyloidosis, we created five-sixths nephrectomized transgenic mice. We will analyze these mice.

为了阐明透析相关淀粉样变性的发病机制并建立治疗方法，我们通过RT-PCR克隆了人β_2-M cDNA。我们将人β_2-M cDNA插入pCAGGS独特的XhoI位点。我们产生了过表达人β_2-M的转基因小鼠（F0 5系）。我们通过RT-PCR和RNA印迹分析证实了人β_2-MmRNA，通过蛋白质印迹分析证实了血清和尿液中的人β_2-M。我们通过 F1 交配产生纯合转基因小鼠。血清人β_2-M水平(20-30mg/l)与血液透析患者的水平一样高。我们无法在转基因小鼠中观察到透析相关的淀粉样变性。这些结果表明，只有hyper β_2-M不能引起透析相关淀粉样变性。我们观察患有慢性肾功能衰竭的透析相关淀粉样变性患者。为了增加透析相关淀粉样变性发展的关键因素——慢性肾功能衰竭，我们创造了六分之五的肾切除转基因小鼠。我们将分析这些小鼠。

项目成果

Fumitake Gejyo: "The clinical effect of a β_2-microglobulin adsorption column of direct hemoperfusion Type [Lixelle] on dialysis-related-amyloidosis : A prospective multi-center controlled β_2-microglobulin adsorption column study (βMACS)"Kidney and Trans

Fumitake Gejyo：“直接血液灌流型 [Lixelle] β_2-微球蛋白吸附柱对透析相关淀粉样变性的临床效果：前瞻性多中心控制 β_2-微球蛋白吸附柱研究 (βMACS)” 肾脏和转运

Hiroki Maruyama: "Requiring higher doses of erythropoietin suggests pregnancy in hemodialysis patients."Nephron. 79. 413-419 (1998)

Hiroki Maruyama：“需要更高剂量的促红细胞生成素表明血液透析患者怀孕。” 肾单位。

Hiroki Maruyama: "Pre-and postoperative management of patients with destructive spondyloarthropathy."Jpn.J.Clin.Dial.. 14. 83-89 (1998)

Hiroki Maruyama：“破坏性脊柱关节病患者的术前和术后管理。”Jpn.J.Clin.Dial.. 14. 83-89 (1998)

丸山弘樹: "腎性貧血に対する発現プラスミドcDNAによる遺伝子治療の基礎的検討"腎性貧血研究会平成11年度研究報告集. 205-214 (2000)

Hiroki Maruyama：“使用表达质粒 cDNA 治疗肾性贫血的基因治疗的基础研究”肾性贫血研究组 1999 年研究报告 205-214 (2000)。

丸山弘樹: "Annual review腎臓2001透析アミロイドーシスによる関節症の治療"中外医学社. 251 (2001)

Hiroki Maruyama：“2001 年肾透析淀粉样变性关节病治疗年度回顾”Chugai Igakusha 251 (2001)。