各種刺激に対する角膜上皮細胞、結膜林細胞の細胞内カルシウムイオン動態

角膜上皮细胞和结膜林细胞响应各种刺激的细胞内钙离子动态

• 批准号: 10671653
• 负责人: 高橋 俊明
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10671653/
• 关键词: 角膜上皮細胞; 細胞内カルシウムイオン濃度; 蛍光強度; アデノシン三リン酸

細胞内2次メッセンジャーである細胞内カルシウム濃度([Ca^<2+>]_i)の変化を,細胞内に負荷したCa^<2+>蛍光指示薬の蛍光強度を測定することによって,各種刺激に対する細胞内の反応をリアルタイムに捉えることができる.我々はすでに角膜上皮細胞を用い,神経伝達物質であるサブスタンスPやアデノシン三リン酸(ATP)が[Ca^<2+>]_iに影響することを明らかにした.平成10年度においては,家兔角膜上皮細胞を用いて研究を行い,これまでの研究結果を更に詳細に検討した.その結果を以下に示す.1. ATPで角膜上皮細胞を刺激すると,[Ca^<2+>]_iの急峻な立ち上がりの初期相と持続的な高値を示す維持相からなる二相性の変化が観察された.初期相は細胞内Ca^<2+>ストアからの放出が,また,維持相は細胞外からのCa^<2+>の流入が関与していると考えられた.2. 維持相における細胞外からのCa^<2+>の流入は,細胞膜に存在するP2受容体を介して引き起こされ,さらにP2受容体のサブタイプを検索したところ,P2Y受容体が関与していることが示唆された.3. 維持相では,角膜上皮細胞層の中間翼細胞層において[Ca^<2+>]_iの律動的な変動が観察され,その変動は近接した細胞間でしばしば同期していたが,他の層へ伝播することはなかった.このことから,角膜上皮細胞の細胞外ATPに対する反応性は,細胞の分化度によって異なると考えられた.

Changes in intracellular calcium concentration ([Ca^<2+>]_i), intracellular calcium load, and light intensity measurements of intracellular calcium and light indicators. I am not interested in the use of corneal epithelial cells, but I am interested in the use of [Ca^2+]_i. In the 10th year of Heisei, rabbit corneal epithelial cells were studied in the middle of the study, and the results of this study were discussed in detail. The results are shown below. 1. ATP stimulates corneal epithelial cells,[Ca^<2+>]_i, and the initial phase, the maintenance phase, and the biphasic phase are observed. In the initial phase, intracellular Ca^<2+> release is regulated, and in the maintenance phase, extracellular Ca^<2+> influx is regulated. 2. P2 receptors are present in the cell membrane during the maintenance phase of extracellular Ca <2+> influx. P2 receptors are present in the cell membrane during the maintenance phase. In the maintenance phase, the rhythmic movement of [Ca^<2+>]_i in the corneal epithelial layer and the intermediate wing cell layer was observed, and the movement of the adjacent cells was observed. The extracellular ATP of corneal epithelial cells is related to the degree of differentiation of cells.

项目成果

Katsura Kimura: "Effect of ATP and analogues on [Ca^<2+>]idynamics in the rabbit corneal epithelium." Arch.Histol.Cytol.62・1(in press). (1999)

Katsura Kimura：“ATP 及其类似物对兔角膜上皮细胞 [Ca^<2+>]idynamics 的影响”Arch.Histol.Cytol.62·1（出版中）。

Yohichi Satoh: "Application of real-time confocal microscopy for observation of living cells in tissue specimens." Human Cell. 11・4(in press). (1999)

Yohichi Satoh：“实时共聚焦显微镜在组织样本中观察活细胞的应用。”11・4（出版中）。

Katsura Kimura: "Application of real time confocal microscopy to observations of ATP-induced Ca^<2+>-oscillatory fluctuations in intact comeal epithelial cells." Acta histochemica. 32・1(in press). (1999)

Katsura Kimura：“应用实时共聚焦显微镜观察完整角膜上皮细胞中 ATP 诱导的 Ca^2+-振荡波动。” Acta histochemica（组织化学学报）32·1（出版中）。