アクチベーションタギング法による環境ストレス耐性植物の作製と原因遺伝子の単離

使用激活标签方法创建耐环境胁迫植物并分离致病基因

• 批准号: 10876070
• 负责人: 山内 靖雄
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10876070/
• 关键词: アクチベーションタギング; 遺伝子活性型突然変異; 環境ストレス耐性植物; シロイヌナズナ; タバコ; 発現活性型突然変異; 環境ストレス

本研究では、強力な遺伝子転写プロモーターを植物に人為的に導入し、無作為に種々の植物ゲノム遺伝子の転写を活性化させることにより、さまざまな転写活性型突然変異体を作製し、原因となっている転写活性化された遺伝子のクローニングをするアクチベーションタギング法を用いて、環境ストレス耐性に関与する遺伝子をクローニングすることを最終目的として実験を行った。実験材料は当初はタバコとシロイヌナズナを用いて行ったが、シロイヌナズナを用いる形質転換係が芳しくなく、効率的に変異体を作製することができなかったので、当研究室で確立しているタバコを用いた形質転換系を用いて変異体植物作製を集中的に行った。本実験ではアグロバクテリウム(GV3101)とアクチベーションタギング用プラスミド(pPCVICEn4HPT)を組み合わせ、タバコ葉片に感染法によりプロモーターを導入した。プロモーター導入後のタバコカルスを抗生物質(ハイグロマイシン)を含んだ培地で選抜し、変異体植物タバコを完全体に再生した。第一世代の形質転換体タバコは種子を得るため、約6ヶ月間種子が完熟するまで栽培した。その結果、計191系統の形質転換体タバコを得ることができた。現在、得られた突然変異体タバコを播種し、塩ストレス、乾燥ストレスを負荷し、ストレスに耐性を持った個体を選抜中である。また、これらの形質転換体タバコのうちいくつかは、形態的に野生株と異なっているものがあり、今後はこのようなタバコ個体の遺伝子解析も行う予定である。

In this study, we found that there was a strong genetic mutation in plants that was artificially introduced into the plant, and that there was no genetic mutation in plants that was artificially introduced into the plant, and that there was a strong genetic mutation in plants that was artificially introduced into the plant, and that there was a strong genetic mutation in plants that was artificially introduced into the plant. The environment is the key to success. The material is used in the form of a variety of materials, such as plants, etc. This is the first time that the virus has been introduced into the system. The virus has been introduced into the system. The virus has been introduced into the system. After the introduction of the plant, the plant is completely regenerated. The seed of the first generation is mature in about 6 months. The results of the calculation of the 191 system are as follows: Now, there is a sudden change in the selection of individuals who are sowing seeds, eating and drying, and having patience. For example, if you want to change the shape of the plant, you can change the shape of the plant.