フリーラジカルを介した光フェントン試薬による新しい非特異的脳局所部位破壊法

一种新的利用自由基介导的光芬顿试剂的非特异性局部脑破坏方法

• 批准号: 10878148
• 负责人: 佐々木 和男
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: University of Toyama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10878148/
• 关键词: フリーラジカル; 紫外線; 脳破壊; フェントン試薬

平成12年度における研究実績は以下のとおりである。神経細胞のモデル細胞であるPC-12D細胞培養液中に光フェントン試薬(NP-III)を混ぜ、紫外線を照射してヒドロキシラジカルを発生させると、その後24時間の培養中有意に生細胞数は減少する。減少の程度は1μMのNP-IIIを30分間取り込ませ、2分間紫外線を照射した条件下で約40%である。なお、生細胞の染色はトリパンブルーにより行った。このようなラジカルによる細胞死を逆に防ぐ抗酸化作用につき、カルニチン、アセチルカルニチン、リポ酸及びアスコルビン酸を用いて検討した。1.カルニチンの作用:カルニチンをNP-IIIと同時にそれぞれ25、50、75、100μMの濃度で培養液中に混ぜたが、いずれの濃度でも対照と比べ生細胞数に変化はなかった。2.アセチルカルニチンの作用:アセチルカルニチンをNP-IIIと同時にそれぞれ25、50、75、100μMの濃度で培養液中に混ぜたところ、対照と比べ50μMの濃度で生細胞の数は有意に増加(すなわち減少の程度は約20%)した。このことからアセチルカルニチンには抗酸化作用のあることが明らかになった。3.リポ酸及びアスコルビン酸の作用:リポ酸(5、10、25、50μM)及びアスコルビン酸(2.5、5、7.5、10μM)は強力な抗酸化物質であるが、この系ではいずれの濃度でも抗酸化作用を示さなかった。4.生及び死細胞の可視化:生細胞及び死細胞を可視化するためにHoechst33342(生細胞、緑)とPerodium Iodide(死細胞、赤)で染色したところ、アセチルカルニチン投与の場合、死細胞(赤)が減少していることが容易に検出できた。

Heisei 12 years of research achievements are as follows: In PC-12D cell culture medium, the number of cells was decreased intentionally after 24 hours of incubation with NP-III and UV irradiation. The degree of reduction is about 40% under the condition of 1μM NP-III for 30 minutes and ultraviolet radiation for 2 minutes.なお、生细胞の染色はトリパンブルーにより行った。The cell death mechanism of this kind is to prevent the anti-acidification effect, such as anti-acid, anti-acid and anti-acid. 1. The effect of culture medium: NP-III and NP-III were mixed at concentrations of 25, 50, 75 and 100μM, respectively, and the concentration of NP-III and NP-III was mixed at concentrations of 25, 50, 75 and 100μM. 2. The effect of culture medium: NP-III and NP-III at concentrations of 25, 50, 75 and 100μ M. The acid resistance function of the acid resistance function is different from that of the acid resistance function. 3. The effect of different acids: different acids (5, 10, 25, 50μM) and different acids (2.5, 5, 7.5, 10μM) are strong anti-acidification substances. 4. Visualization of live and dead cells: visualization of live and dead cells Hoechst33342(live cells, green) and Perdium Iodide(dead cells, red) staining

项目成果

Seiichi Matsugo: "Age-dependent changes in lipid peroxide levels in peripheral organs, but not in brain, in senescence-accelerated mice"Neuroscience Letters. 278. 105-108 (2000)

Seiichi Matsugo：“在衰老加速的小鼠中，外周器官中脂质过氧化物水平的年龄依赖性变化，但在大脑中则不然”《神经科学快报》。