(6-4)光回復酵素と光シグナル受容体

(6-4)光活化酶和光信号受体

• 批准号: 11146206
• 负责人: 藤堂 剛
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11146206/
• 关键词: 紫外線; DNA損傷; 光回復酵素; 概日リズム; クリプトクローム; CRYタンパク

光回復酵素の作用メカニズムを解明するとともに、光回復酵素・青色光受容体タンパクファミリーの全体像を明らかにすることを目指している。光回復酵素については、Xenopusよりクローンした遺伝子に点突然変異を導入し、それらのrecombinantタンパクの活性をチェックする事により、酵素活性に変化があらわれる変異体を同定した。損傷特異的なDNA結合活性は残っているものの、DNA修復能を失っている、2種類の変異体を得た。これらの変異体の解析から、どのようなメカニズムにより修復反応が起こっているのか、理論的な展開が期待される。また、酵素の作用メカニズムを明らかにする有力な方法として、基質と結合した状態での結晶構造の決定を目指している。しかしながら、良好な状態の結晶はまだ得られていない。CRYタンパクについては、マウス、ゼブラフィッシュ、ショウジョウバエを用い、その機能解析を行っている。マウスには2種の青色光受容体遺伝子が存在するが、各々の遺伝子のノックアウトマウスを作成し、その表現型を観察した。mCry1,mCry2各々の遺伝子をノックアウトしたマウスは、行動リズムの周期が、それぞれ短くまたは長くなっていた。これらからダブルノックアウトマウスを作成し、その行動リズムを観察したところ、恒暗条件では、全くリズムを失った。この事は、この遺伝子が概日リズムの時計本体として機能していることを示している。現在、in vitroでの解析系を確立し、これらのタンパクの作用メカニズムの解明を目指している。

The role of photoreactivation enzymes in the development of photoreceptors in the human body The light recovery enzyme changes the enzyme activity, Xenopus changes the enzyme activity, and changes the enzyme activity. Damage-specific DNA binding activity, DNA repair activity, and 2 types of heterogeneic activity were detected. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone who's been in a relationship with someone else. A powerful method for determining the crystal structure of a substrate by enzyme interaction The crystal in good condition is in good condition. CRY There are two kinds of cyan photoreceptors in the genome, and their phenotypes are observed. mCry1, mCry2 are the only ones that have a short history. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. This is the first time that the clock has been activated. Now, in vitro, the analysis system is established, and the function of the system is explained.

项目成果

H. Asahina et al.: "Expression of mammalian DNA photolyase confers light-dependent repair activcity and reduces mutations of UV-irradiated shuttle vector in xeroderma pigmentosum cells"Mutat. Res.. 435. 255-262 (1999)

H. Asahina 等人：“哺乳动物 DNA 光裂合酶的表达赋予光依赖性修复活性，并减少着色性干皮病细胞中紫外线照射的穿梭载体的突变”Mutat。

T.Todo: "Functional diversity of the DNA photolyase/blue light receptor family"Mutat.Res.. 434. 89-97 (1999)

T.Todo：“DNA 光解酶/蓝光受体家族的功能多样性”Mutat.Res.. 434. 89-97 (1999)

Z. -B. han et al.: "Agenetic effect of altered gravity : mutations induced by simulated hypogravity and hypergravity in microsatellite sequences of human tumor cells"Mutat. Res.. 426. 1-10 (1999)

Z.-B。

T.Ishikawa et al.: "DCRY is a Drosophila photoreceptor protein implicated in light entrainment for circadian rhythm"Genes to Cells. 4. 57-66 (1999)

T.Ishikawa 等人：“DCRY 是一种果蝇感光蛋白，与昼夜节律的光夹带有关”基因到细胞。

M.Vitaterna et al.: "Differential regulation of mammalian Period genes and circadian rhythmicity by Cryptochrome 1 and 2"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 96. 12114-12119 (1999)

M.Vitaterna 等人：“隐花色素 1 和 2 对哺乳动物周期基因和昼夜节律的差异调节”Proc。