葉緑体形成制御に関わるサイトカイニンの情報伝達機構

细胞分裂素信息转导机制参与控制叶绿体形成

• 批准号: 11151208
• 负责人: 高宮 建一郎
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11151208/
• 关键词: 葉緑体; サイトカイニン; NADPH-プロトクロロフィリド還元酵素; キュウリ; 情報伝達; 形態形成; クロロフィル

本年度は計画に従い、次の実験を行った。1.キュウリのNPR遺伝子転写開始上流2.3kbpから180bpまでのいくつかの欠失領域とルシフェラーゼ遺伝子との融合遺伝子を構築し、パーティクル・ガンでキュウリ黄化子葉に打ち込み、暗所でベンジルアデニン(BA)処理を行いシス領域の解析を行った。その結果、455bpと180bpの間にシス領域が存在することが示唆された。2.600bpから90bpの間で約50bpの長さで順次欠失を持つコンストラクトを構築し、1と同様の実験を行った(リンカースキャン)が、BA処理に目立って不応答な箇所は見出されなかった。このことから、455bpと180bpのあいだの複数の領域の相互作用でBAに対する応答性が生じることが示唆された。3.MGDG合成酵素でも、転写開始点上流約2.3kbpを含む領域とルシフェラーゼ遺伝子との融合遺伝子を構築して、1と同様な実験を行ったところ、此の領域にBA応答性のシス領域の存在が示された。4.今後はDNAフットプリントやゲルシフトアッセイなどの方法によってシス領域を同定する予定である。

This year's plan is to implement the plan in the middle and the second time. 1. NPR gene coding start upstream 2.3kbp from 180bp to 180bp to 180bp to 1 As a result, the 455bp and 180bp space domains exist. 2.600bp ~ 90bp ~ 50bp ~ 1000bp ~ 1000bp ~ 100bp ~ 10bp ~ 100bp ~ 10bp ~ 1 The interaction between these two domains, 455bp and 180bp, is responsible for the development of these domains. 3. MGDG synthesis enzyme is about 2.3kbp upstream from the start point of writing, and the existence of BA responsive domain is demonstrated by the construction of fusion gene. 4. In the future, the method of DNA extraction will be determined.

项目成果

Fusada, N., Takamiya, K.: "NADPH-protochlorophyllide oxidoreductase in cucumber is encoded by a single gene and its expression is transcriptionally enhanced by illumination"Photosynthesis Research. (印刷中). (2000)

Fusada, N., Takamiya, K.：“黄瓜中的 NADPH-原叶绿素氧化还原酶由单个基因编码，其表达通过光照而转录增强”光合作用研究（2000 年出版）。

Miege, C., Takamiya, K., Joyard, J.: "Biochemical and topological properties of type A MGDG Synthase, a spinach chloroplast envelope enzyme catalyzing the synthesis of both prokaryotic and eukaryotic PIDG"Eur. J. Biochem.. 265. 990-1001 (1999)

Miege, C.、Takamiya, K.、Joyard, J.：“A 型 MGDG 合酶的生化和拓扑特性，这是一种催化原核和真核 PIDG 合成的菠菜叶绿体包膜酶”Eur。

Kuroda, H., Takamiya, K.: "Expression of NADPH-protochlorophyllide oxidoreductase gene in fully green leaves of cucumber"Plant Cell. Physiol.. (印刷中) 41 (2). (2000)

Kuroda, H., Takamiya, K.：“NADPH-原叶绿素氧化还原酶基因在黄瓜全绿叶中的表达”植物细胞..（出版中）41（2）（2000）。