in vitro体外受精系を用いた被子植物の初期胚形成機構の顕微分子生物学的研究

利用体外受精系统对被子植物早期胚胎发生机制进行小分子生物学研究

• 批准号: 11163206
• 负责人: 黒岩 常祥
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11163206/
• 关键词: 重複受精; トレニア; 体外受精系; 花粉管の誘導; 胚発生

本研究目的は、これまでの成果を踏まえて、先ず体外重複受精を高頻度で行い、高頻度で胚発生を正常に行う系の確立を目指す。この系を用いて、花粉管の誘導機構、重複受精時における精細胞の挙動、重複受精直後から始まるオルガネラの偏在と細胞分化、そして初期胚の形成機構をナノ分子生物学的に解析することである。これらの目的達成のためには、1個の細胞、1個のオルガネラの分子生物学的解析が必要であり、従来に全くない顕微操作技術の開発をおこなうことであった。材料としてT-fournieriなどを用いて次の課題で進めてきた。(1)高頻度体外重複受精系の確立を行い、(2)体外重複受精系を用いて受精の瞬間での精細胞の挙動の解析に成功し、(3)体外重複受精系を用いて、受精の瞬間からおこるオルガネラの偏在と細胞分化の機構を明らかにした。また(4)体外重複受精系を用いて初期胚の発生系の確立し、そして(5)光ピンセット法を用いて、1個の細胞や受精卵及び1個の初期胚を分子生物学的に解析する方法を開発した。

The purpose of this study is to establish the high frequency and high frequency of embryo development in vitro The analysis of molecular biology on the mechanism of pollen tube induction, sperm cell movement during repeated fertilization, initial embryo development and cell differentiation after repeated fertilization. To achieve this goal, it is necessary to analyze the molecular biology of 1 cell, 1 cell and 1 cell. The material and the fournieri are used in the second time and the subject is advanced. (1)(2) In vitro repeated fertilization (IVF) lines were successfully established;(3) In vitro repeated fertilization (IVF) lines were successfully used; (4) Development of a method for molecular biological analysis of in vitro repeated fertilization systems using one cell, one fertilized egg and one embryonic embryo.

项目成果

Matsunaga, S., Schutze, K., et al.: "Single pollen typing combined with lawe0mediated manipulation"Plant Journal. 20. 371-378 (1999)

Matsunaga, S., Schutze, K., et al.：“单一花粉分型与 lawe0 介导操作相结合”植物杂志。

Nishimura, Y., Misumi, O., et al.: "Active digestion of mt derived chloroplast DNA in individual zygotes of Chlamydomonas reinhardtii revealed by the Optical tweezers"Proc. Natil. Acad. Sci. USA. 209. 222-232 (1999)

Nishimura, Y.、Misumi, O. 等人：“光镊揭示了莱茵衣藻单个受精卵中 mt 衍生叶绿体 DNA 的主动消化”Proc.

Higashiyama,T.,Kuroiwa,H. et al.: "Explosive discharge of pollen tube contents in Torenia."Plant Physiol.. 122. 11-13 (2000)

东山，T.，黑岩，H.

Miyazawa, Y., Sakai, A., et al.: "Auxin and cytokinin have opposite effects on amyloplast development and expression of the ADP-glucose pyrophosphorylase gene in culture tobacco cells BY-2"Plant Physiol.. 121. 461-469 (1999)

Miyazawa, Y., Sakai, A., et al.：“生长素和细胞分裂素对烟草培养细胞 BY-2 中淀粉体的发育和 ADP-葡萄糖焦磷酸化酶基因的表达具有相反的影响”植物生理学.. 121. 461-469

Kuriyama, H., Takano, H., et al.: "Characterization of Chlamydomonas reinhardtii zygote specific cDNAs that encode novel proteins containing ankyrin repeats and WW domains"Plant Physiol.. 119. 873-884 (1999)

Kuriyama, H.、Takano, H. 等人：“编码含有锚蛋白重复序列​​和 WW 结构域的新型蛋白质的莱茵衣藻合子特异性 cDNA 的表征”Plant Physiol.. 119. 873-884 (1999)