アサガオの組織分化に関する変異体の解析

牵牛花组织分化相关突变体分析

• 批准号: 11163225
• 负责人: 星野 敦
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11163225/
• 关键词: 組織分化; 易変性変異体; トランスポゾン; アサガオ; マルバアサガオ; トランスポゾン・ディスプレイ

本研究の目的は、高等植物の組織分化に関する易変性変異体を材料に、その原因遺伝子を機能解析することで、組織分化過程の一端を明らかにすることである。ここではトランスポゾンにより誘発されたと思われる、アサガオの「松島(yellow-mutable)」とマルバアサガオ「黄緑葉(yellow leaf)」変異座の単離を試みた。これまでの知見から前者にはTpn1ファミリー、後者にはTip100ファミリーに属するトランスポゾンの関与が示唆されており、まず、それぞれのトランスポゾンの配列に至適化したTD(Transposon Display)法を開発した。この方法は、サンプルDNAの4塩基認識制限酵素による処理、アダプター付加、アダプター配列とトランスポゾンの末端逆反復配列に相補的なプライマーを用いた予備的PCRおよび選択的PCR、ポリアクリルアミド電気泳動の各ステップにより、トランスポゾンの隣接配列をフィンガープリンティングのパターンとして可視化する。各ステップの条件検討を行い、特異的なAFLP断片を再現性良く得ることに成功した。さらに、Tpn1ファミリー用に確立したTD法では、紫色の地に青い絞り模様の花を咲かせる易変性「紫(purple)」遺伝子座のクローニングに採用した結果、変異座に連鎖したAFLP断片の検出に成功し、この方法の有効性を確認した。そこで、TD法を用いて易変性変異体と生殖細胞復帰変異体のゲノム構造を比較検討しており、原因遺伝子中のトランスポゾンに近接したAFLP断片の検出を試みている。

The purpose of this study is to clarify one end of the process of tissue differentiation in higher plants by analyzing the functions of different materials and genetic components. "Yellow leaf" and "yellow mutable" are different. The former is Tpn 1, the latter is Tpn 100, the latter is Tpn1, the former is Tpn1, the latter is Tpn 1, the latter is Tpn 1, the former is Tpn 1, the latter is Tpn 1, the latter is Tpn 1, the former is Tpn 1, the latter is Tpn 1, the latter is Tpn 1, the former is Tpn 1, the latter is Tpn 1, the former is Tpn 1, the latter is Tpn 1, the Tpn 1, the latter is Tpn 1, the Tpn The method comprises the following steps of: processing, adding, aligning, and mapping the 4-terminal restriction enzyme of the protein DNA; preparing PCR and selecting PCR in the middle of the application; and visualizing the adjacent alignment of the protein DNA. Each AFLP fragment is reproducible and successful. The TPN1 gene fragment detection was successful and the validity of the TD method was confirmed. A comparative study of the genetic diversity of germ cells and their genetic structure was conducted using the TD and TD-based methods.

项目成果

Y.Johzaka-Hisatomi et al.,: "Charactreization of the chalone synthase genes expressed in flowers of the common and Japanese morning glories."Genes Genet.Syst.. 74. 141-147 (1999)

Y.Johzaka-Hisatomi 等人，：“常见花和日本牵牛花中表达的查酮合酶基因的特征化。”Genes Genet.Syst.. 74. 141-147 (1999)

H.Takahashi et al.,: "Capturing of a genomic HMG domain sequence by an En/Spm related ransposable element Tpn1 in the Japanese morning glory."Mol.Gen.Genet.. 261. 447-451 (1999)

H.Takahashi 等人：“通过日本牵牛花中的 En/Spm 相关转座元件 Tpn1 捕获基因组 HMG 结构域序列。”Mol.Gen.Genet.. 261. 447-451 (1999)

S.Iida et al.,: "Floricultural traits and transposable elements in the Japanese and common morning glories."Annal.New York Acad.Sci.. 870. 265-274 (1999)

S.Iida 等人，：“日本牵牛花和普通牵牛花中的花艺特征和转座元素。”Annal.New York Acad.Sci.. 870. 265-274 (1999)

A.Hasebe et al.,: "The novel insertion sequences IS1417, IS1418 and IS1419 from Burkholderia glumae and their strain distribution."Plasmid. (in press). (2000)

A.Hasebe 等人：“来自荚壳伯克霍尔德氏菌的新插入序列 IS1417、IS1418 和 IS1419 及其菌株分布。”质粒。

K.Shiokawa et al.,: "The functional expression of the CHS-D and CHS-E genes of the common morning glory (Ipomoea purpurea) in Escherichia coil and characterization of their gene prodcts."Plant Biotechnology. (in press). (2000)

K.Shiokawa 等人：“普通牵牛花 (Ipomoea purpurea) 的 CHS-D 和 CHS-E 基因在大肠杆菌中的功能表达及其基因产物的表征。”植物生物技术。