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川崎病の病因の未知抗体をコードする遺伝子探索にもとづく独創的手法による解明と展開

使用基于寻找编码导致川崎病的未知抗体的基因的原始方法进行阐明和开发

基本信息

批准号：
11877129
负责人：
近藤直実
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877129/
关键词：
川崎症 B細胞 VDJ領域 CDR3 川崎病

项目摘要

平成12年度は(1)川崎病患者でみられる抗体をコードしている免疫グロブリン遺伝子を決定するために川崎病患者末消リンパ球からDNAおよびRNAを採集し、RNAからはcDNAを作成した。DNAまたはcDNAを用いて、免疫グロブリン遺伝子のvariable regionのVDJ とconstant regionのCγ部分のprimerを設定して、PCRまたはRT-PCRを用いて増巾させ、またnested PCRを行い、増巾バンドをPC19ベクターにてクローニングした。これから川崎病において使用されているV領域,CDR3領域の塩基配列の特性を決定し、さらにアミノ酸配列を決定した。(2)川崎病におけるV領域のアミノ酸配列からコンピューターを用いて系統樹を作成したところ予想に反して幅広く分布していたが、一部に集積の傾向が認められた。この集積性が他の既知の抗原、溶連菌、ウイルスなどに対する抗体タンパクのV領域といかなる差異を有するか検討した。(3)以上の結果をコンピューター分析することにより、幾つかの興味ある結果が得られ、さらに他の検索結果から、川崎病の病因候補の重要な1つとして溶連菌感染が示されつつある。

In 2012, Kawasaki disease patients were diagnosed with antibodies, and DNA and RNA were collected and RNA cDNA was generated. DNA and cDNA were used, the VDJ of the variable region and the primer of the Cγ part of the constant region of the immune promoter were set up, PCR and RT-PCR were added, nested PCR was carried out, and the added cDNA was processed on the PC19 platform. In Kawasaki disease, the use of V-domain, CDR3 domain is determined by the characteristics of the base alignment, and the use of V-domain is determined by the acid alignment. (2)Kawasaki disease is caused by the distribution of acid in the V domain, and the tendency of aggregation in the V domain is recognized. The aggregation of these antibodies is discussed in relation to other known antigens, lysosomes, and V-domains. (3)When the above results are analyzed in a computer, several interesting results are obtained, and other search results are also found, which are important candidates for the etiology of Kawasaki disease. Lysobacter infection is also shown.