体外に取り出したゼブラフィッシュ全脳の長期培養法の開発・基礎的研究とその応用

斑马鱼全脑离体长期培养方法的开发、基础研究及应用

• 批准号: 11878165
• 负责人: 中安 博司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11878165/
• 关键词: 培養脳; ゼブラフィッシュ; グリア細胞

今回、ゼブラフィッシュ脳の培養に成功したのは、厚さが0.5mmというその小さなサイズが最大の理由であろうと思われる。実際、この程度であればマウスの脳由来の切片でもかなり長期にわたり培養可能である事が分かっているので、よく考えれば驚くに当たらないのかもしれない。また、魚類の脳内には全体的に隙間が多く、神経細胞とグリアが密に詰まっている中を血管が縦横に走るという哺乳類に見られるような過密状態ではない。また、魚類は元々が、えら呼吸であるために絶対的な酸素要求量も少ない。このような魚類特有の幸運な事情があるにしても、全脳培養の系は今まで頭蓋骨にはばまれて出来なかった不可能に近いような夢を可能にならしめる画期的な技術の開発に成功した。脳の培養は可能であるが、未解明の点は2つある。第一は恐らく培養脳に充分な酸素が供給されていないということである。脳をニトロセルロース膜の上において、培地をひたしておいて培養するのであるが、このとき、たとえば液をかぶりすぎたりすると何故か脳は死ぬ。第二には神経細胞が出す未知の栄養因子が必要らしい、ということである。単離した神経細胞を培養しておいてその上清に放出されたものを利用している。ゼブラフィッシュのグリア細胞の細胞株で置きかえることを試みて部分的に成功している。また拡散チャンバーの中で酸素濃度を95%にまで上げてみた。酸素分圧の上昇により、脳はよりよい条件に置かれることになり、安定した長期生存につながることがわかった。やってみて分かった事であるが、培養脳の物質代謝は速く、数時間で培地が黄色く変わるほどである。このため頻繁な培地交換が必要であったが、チャンバーの利用は、酸素分圧の問題以外にも培地の交換の点でも効果的であると結論した。

This time, I won't let you know that you won't be successful, and that you won't be successful, and that you won't miss the biggest reason for your success. This time, you won't be successful. I don't know. 0.5mm. The cause of the problem is that it is possible to make a long period of time, so that you can learn how to deal with the problem. There are many gaps in the gap of all animals, such as mammals, mammals, breast-feeding, breast-feeding and breast-feeding. The amount of acid required is very low in terms of the amount of acid required. It is very fortunate that many things have happened, and the whole training system is due to the fact that it is not possible to improve the success of the technology during the drawing period. You may have a problem, but you may not be able to understand it. The first one is to make sure that the acid is fully supplied to the hospital. Please tell me what happened on the membrane. I didn't know why I died. In the second place, there is a list of unknown factors, which are necessary and necessary. The supernatant was released from the supernatant to make use of the supernatant. Please check the success rate of the cell line in the first part of the experiment. The acidity is 95%. There is no change in the temperature. In terms of acid concentration, the conditions are different, such as long-term survival and long-term survival. The train is divided into two parts: one day, another day, one day, another day, the other day, the other day. In addition to the problem of acid fractionation, it is necessary to study the effects of different concentrations of acid. in addition to the problems of acid fractionation, it is necessary to improve the quality of the fruit.

项目成果

Tomizawa, K., Inoue, Y., Doi, S. and Nakayasu, H.: "Monoclonal Antibody Stains Oligo dendrocytes and Schwann cells in Zebrafish (Danio rerio)"Anat. Embryol.. 201. 227-232 (2000)

Tomizawa, K.、Inoue, Y.、Doi, S. 和 Nakayasu, H.：“单克隆抗体染色斑马鱼 (Danio rerio) 中的寡树突胶质细胞和雪旺细胞”Anat。