权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

虚血による細胞死に関する新規遺伝子のクローニングとその解析

缺血性细胞死亡相关新基因的克隆与分析

基本信息

批准号：
00J02333
负责人：
小澤健太郎
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は低酸素に暴露したアストロサイトに誘導される蛋白のクローニングを試み、小胞体に局在する分子シャペロンORP150をクローニングし、ORP150が低酸素、急性虚血などのストレスにおけて細胞の生存に大きな役割を果たしていることを証明してきた。今回、我々は砂ネズミの5分虚血によって起こる遅発性神経細胞視のモデルを使い、急性期の神経細胞死でなく、慢性期の神経細胞死においても小胞体にストレスがかかり、ORP150を強制発現することにより、神経細胞死を防ぐことができるのではないかと仮定した。砂ネズミの5分虚血モデルを作成、その海馬部分をORP150に対する特異的な抗体を使ってORP150の発現を検討したところ、海馬の神経細胞においてORP150の発現が上昇していた。次に砂ネズミの海馬にORP150を強制発現させるため、我々はORP150を強制発現させるアデノウイルスを砂ネズミの海馬のCA1領域に打ち込み、その後5分間の虚血をおこなった。ORP150を強制発現させるとウイルスに感染した領域に限局して、神経細胞死が防がれており、ORP150が遅発性神経細胞死を抑制していることが証明された。またラットより初代培養細胞をとり、その神経細胞にアデノウイルスを感染させた後、細胞死を起こすような薬剤に暴露し、ORP150の細胞保護のメカニズムを検討したところ、ツニカマイシン、サプシガルギンなど小胞体にストレスを与える薬剤とグルタミン酸においてはORP150の細胞保護効果が認められたが、砒素、過酸化水素などにおいては認められなかった。このことより砂ネズミの海馬における遅発性神経細胞死は少なくとも部分的には小胞体障害による細胞死であり、ORP150を強制発現させることでその細胞死を抑制することができることが証明された。このことは脳梗塞における遺伝子治療の可能性を示すものである。

We have demonstrated that low acid exposure induces high levels of protein expression in cells, and that low acid exposure induces high levels of protein expression in cells at ORP150. In the present study, we found that 5 minutes of blood deficiency in the development of the brain cells, acute stage of brain cell death, chronic stage of brain cell death in the small cell body, ORP150 stress development, brain cell death prevention, and so on. 5 minutes after the formation of the hippocampus, ORP150 was detected in the hippocampus, and ORP150 was detected in the hippocampus. The hippocampus ORP150 of the second generation is stressed, and the hippocampus ORP150 of the second generation is stressed. ORP150 is a stress inhibitor that inhibits neuronal cell death and inhibits neuronal cell death. The cells in primary culture were exposed to the presence of an inhibitor, ORP150, and the protective effect of ORP150 on the cells was investigated. The acid content of the water is too high. This is the first time that we've seen this phenomenon. This is an indication of the possibility of treatment for this disease.