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植物における環境ストレス応答遺伝子の単離と機能解析

植物环境胁迫响应基因的分离及功能分析

基本信息

批准号：
00J06586
负责人：
田村尚
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

1.C7の生理機能の解析C7の生理機能を調べるために、トランスジェニック植物体を作製した。10ライン以上の形質転換体が得られ、PCRにより9ラインで導入遺伝子が確認できた。ノーザン解析により、それらのうち7ラインで恒常的なmRNAの蓄積が見られた。ライン#1のT_3種子を用いて、220mM NaClの塩ストレス、500mMマンニトールの浸透圧ストレス培地で発芽試験を行った。野生型の種子は、それらのストレス下で発芽しなかった。トランスジェニック種子は、NaClによる塩ストレス下で発芽したものの、黄化や根の伸長阻害が見られた。一方、マンニトールによる浸透圧ストレス下ではほぼ正常に発芽した。NaClによる生育阻害が塩ストレスあるいは、浸透圧ストレスのどちらによるか調べるために、60mM LiClのイオンストレスを与えた。その結果、NaClよりも顕著に黄化、根の伸長阻害が見られた。T_0健全葉を用いて浸透圧ストレス耐性を調べた。野生型の健全葉を500mMマンニトールで処理したところ、12時間でほとんど回復できなかった。トランスジェニック植物体葉では、12時間処理後でも回復した。これらの結果より、NtC7はイオン毒性には対応せず、浸透圧変化にのみ対応することが明らかになった。2.ストレス初期応答遺伝子の解析ストレス初期応答遺伝子C15,NtNAKの発現様式を詳しく検討した結果、傷害、200mM NaClによる塩ストレスや500mMマンニトールによる浸透圧ストレスに対して早期一過的に応答することが分かった。C15は病傷害ストレス応答遺伝子を誘導するジャスモン酸やエチレン、浸透圧ストレス応答遺伝子を誘導するアブシジン酸では発現が誘導されなかった。しかし、NtNakはエチレン、ABAに応答しmRNAの蓄積が誘導された。このことから、ストレスシグナルの1つに水圧変化があることも示唆された。

1. Analysis of physiological function of C7 10 or more of the qualitative change body is obtained, PCR is detected, 9 or more of the introduced gene is confirmed. A constant accumulation of mRNA is observed in the analysis of the protein. T_3 seed of the seed #1 was cultured in medium, 220mM NaCl solution, 500mM NaCl solution. Wild type seeds are sprouting. The seeds grow under NaCl, and the roots grow under NaCl. A party, a party, a party. NaCl, 60mM LiCl, 60mM LiCl, 60mM LiCl The results, NaCl, yellow, root elongation resistance are seen. T_0 is a healthy leaf. wild-type healthy leaves 500mM The leaves of the plant were treated for 12 hours and then recovered. The result is that NtC7 is toxic, permeable and toxic. 2. Analysis of the initial response vector C15,NtNAK and its development formula are discussed in detail. Results, injuries, and 200mM NaCl are discussed in detail. C15- The accumulation of ABA mRNA was induced by NtNak. The water pressure changes in the first place, and the pressure changes in the second place.