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カイコの性を決める転写因子BmdsxならびにBmfruの構造と機能

决定蚕性别的转录因子 Bmdsx 和 Bmfru 的结构和功能

基本信息

批准号：
00J08211
负责人：
大林富美
金额：
$ 2.05万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

1.W染色体上の仮想雌性決定遺伝子Femは単離されていないが、レトロトランスポゾン、特にLTR型レトロトランスポゾンはW染色体特異的と言えるほど高密度に蓄積していることを明らかにしている。これらがコードするgagタンパク質にはRNA結合能があるため、Bmdsxの性特異的スプライシング、ひいてはカイコの性決定に関与している可能性がある。W染色体から見つかった数種のLTR型レトロトランスポゾンの転写産物量とDNAのメチル化レベルとの間には負の相関があり、これらの転写制御にはDNAのメチル化が関与していることを明らかにした。DNAのメチル化阻害により、人為的にLTR型レトロトランスポゾンの転写産物量を増加させた結果、Bmdsxのスプライシングパターンに変化は認められなかった。よって、Bmdsxの性特異的スプライシングには、DNAのメチル化や、特定の転移因子が関与している可能性は低いと推測された。2.Bmfruは第6染色体に、ハプロイドゲノムあたり1コピー存在し、選択的スプライシング・プロモーティングを介して少なくとも3種類のアイソフォーム(e40h型、NV型、br9型)を発現することを明らかにした。ゲノム構造を明らかにしたところBmfruは7つのエクソンおよび6つのイントロンから成り、スプライシングのドナー/アクセプターサイトは、GT/CAGであることを明らかにした。Bmfru mRNAの発現が顕著である生殖巣と能、および胚子における定量発現解析により、以下の結果が得られた。1)e40h型は、5齢幼虫後期の精巣特異的に発現量が多い2)脳ではe40h型はほとんど発現しておらず、NV型やbr9型の発現が顕著である。いずれのアイソフォームも、雄脳より雌脳での発現が多く、羽化に伴って転写産物量が急増する3)胚子では産下後9時間に、br9型の転写産物量が急増し、以降産下後20時間までの間に減少する。in situハイブリダイゼーションおよび免疫染色の結果、生殖巣の皮膜や、脳の視葉、食道下神経節における発現が認められた。

1. The female determining gene Fem on the W chromosome is isolated from the chromosome, and the LTR type is isolated from the chromosome. The possibility of RNA binding to Bmdsx gender-specific proteins is discussed. W chromosome has a negative correlation between the number of LTR-type DNA products and the number of DNA products. The increase in the amount of DNA synthesis products due to artificial LTR-type DNA synthesis and the increase in the amount of DNA synthesis products due to artificial LTR-type DNA synthesis and the increase in the amount of DNA synthesis products due to artificial LTR-type DNA synthesis The possibility of the association between Bmdsx sex-specific factors and DNA mutation is low. 2. Bmfru has three types of chromosome (e40h type, NV type, br9 type). Bmfru is a 7-point solution to the problem, and GT/CAG is a 7-point solution to the problem. The expression of Bmfru mRNA was analyzed quantitatively, and the following results were obtained. 1) E40h type, 5) E40h type, 6) E40h type, 6) E40h type, 7) E40h type, 10) E40h type, NV type, 10) E40h type 3) In embryo, the production of br9 type increased rapidly at 9 time after birth, and decreased at 20 time after birth. The results of immunostaining, reproductive membrane, optic lobe and hypoesophageal ganglion were identified.