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出芽酵母における減数分裂時の微小管集合中心に関する分子生物学的研究

酿酒酵母减数分裂过程中微管组装中心的分子生物学研究

基本信息

批准号：
00J09647
负责人：
石原聡
金额：
$ 1.92万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J09647/
关键词：
出芽酵母胞子微小管集合中心減数分裂胞子壁形成グルカン

项目摘要

出芽酵母の胞子形成過程では、微小管集合中心(SPB)と胞子壁の成分が協調して機能して、全く新規に胞子壁を形成する。胞子壁の成熟に伴うグルカン合成機構に興味を持って研究を始めた。これまでの研究から、グルカン合成酵素の推定上の触媒遺伝子には3種類の相同遺伝子(FKS1、FKS2、FKS3)があり、生活環に応じて使い分けられていると報告されている。このうち、減数分裂特異的に転写が上昇するFKS3遺伝子の機能について解析を行った。遺伝子破壊した2倍体株fks3/fks3は減数分裂が正常に進み胞子を形成するが、生成した胞子は高温、エタノール、SDSなどのストレスに感受性を示し野生型と比べて生存率が著しく低下した。一方、fks1/fks1、fks2/fks2破壊株が生成する胞子はこれらのストレスに対して野生型と同様の感受性を示した。fks3/fks3株の胞子を電子顕微鏡で観察すると、野生型の胞子壁は厚さが一定であるのと比較して、変異体では胞子側に貫入したり部分的に薄くなるなどの異常な胞子壁が観察された。また、Fks3pの局在を間接蛍光抗体法で調べたところ、胞子形成直前に前胞子膜付近にドット状に局在していた。これらの結果から、Fks3pは正常な胞子壁形成に必須で胞子内部を保護するための堅牢な胞子壁を構築する役割があると明らかになった。さらに、Fks3pのグルカン合成機能を検証するために、栄養増殖時にFks3pが発現するようにFKS3のプロモーターを置換したキメラ遺伝子を作成した。fks1温度感受性株に過剰発現したところ制限温度においてグルカンの量と生育が回復したことから、Fks3pはFks1pと同じくグルカン合成に関わるの機能があると思われる。以上の実験結果から、グルカンが胞子壁の成熟の段階で重要な働きをしていること、新規タンパク質Fks3pがそのグルカン合成に関わっていることが分かった。現在、以上の結果をまとめて、雑誌に投稿する準備を進めている。

Saccharomyces cerevisiae Saccharomyces cerevisiae cell formation process, microtubule assembly center (SPB), cell wall coordination mechanism, and whole new regulation cell wall formation. The cell wall maturation is accompanied by the synthesis of malondialdehyde in the synthesis mechanism. It is presumed that the catalytic agents (FKS1, FKS2, FKS3) are similar to each other in the research and synthesis of synthetic enzymes, and the life cycle makes it possible to analyze the data. Please write the FKS3 data on the computer to parse the data. The normal meiosis of the diploid strain fks3/fks3 was characterized by low survival rate, low survival rate, high temperature, and low survival rate. One side, fks1/fks1 and fks2/fks2 broke the cell line to produce the cell son, the cell, the wild type, the homotype and the receptivity. The cell wall of fks3/fks3 strain was detected by microarray, the cell wall of wild type was thicker than that of wild type, and the cell wall of wild type was detected by cell wall micrograph. Before the formation of the cell, the front cell membrane was close to the front cell membrane, and the Fks3p bureau was connected with the photoantibody method. The results show that the normal cell wall formation of Fks3p requires internal protection and protection of the cell wall to secure the cell wall. The synthetic machine of Fks3p and FKS3 can be used to determine whether or not you will be able to do so. When you are colonizing, you will be able to determine whether or not you will be able to do so. The temperature sensitive strain of fks1 is sensitive to temperature. The temperature limit is controlled by the temperature limit. The birth rate is different from that of the control strain. The Fks3p temperature sensitive strain is the same as that of the Fks3p temperature sensitive strain. The results of the above experiments show that the mature segments of the cell wall are very important, and that new rules and regulations can be used to synthesize the components of the cell wall. The results show that the mature segments of the cell wall are very important, and the new rules and regulations are very important. Now, as a result of the above results, we are ready to submit contributions and journals to prepare for review.