広塩性魚類の浸透圧制御に中心的役割を果たす塩類細胞の分化誘導機構

诱导盐细胞分化的机制，在高盐鱼类的渗透压调节中起着核心作用

• 批准号: 00J10231
• 负责人: 宮本 健太郎
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J10231/
• 关键词: 広塩性魚類; 浸透圧適応; RBCCプロテイン; 塩類細胞; RING-finger; ユビキチンリガーゼ

広塩性魚類は淡水にも海水にも適応できる驚くべき浸透圧適応能力を持つ。このことから広塩性魚類は浸透圧適応機構の解明における興味深い研究対象と言える。本研究では広塩性魚類の一種であるウナギを用いて、浸透圧適応において重要な役割を担う分子の同定をディファレンシャル・ディスプレイ法により試みた。その結果、ウナギの淡水適応時において特異的な発現を示す新規のRBCC(RING finger-B-box-coiled coil)プロテイン(eRBCC)の同定に成功した。eRBCCは淡水適応時に高い発現を示し、その組織発現はエラに特異的であった。次に海水に適応させたウナギを淡水へ移行しエラのサンプリングを行う移行実験を行い、そのmRNAの発現量の変化を調べたところ、その発現は淡水移行後12時間において海水適応時の約6倍ともっとも高くなることを明らかとした。また、in situハイブリダイゼーションおよび免疫組織染色による解析を行ったところ、その発現部位はエラの呼吸上皮と浸透圧適応に重要な働きを担う塩類細胞とに局在していることが明らかとなり、さらに細胞内でのその局在はそれぞれの細胞の核に特異的なものであった。RING-fingerドメインにはユビキチンリガーゼ活性を持つものが多数報告されている。そこでeRBCCのRING-fingerドメインにおけるユビキチンリガーゼ活性の有無を調べるため、in vitroでのユビキチンリガーゼ活性の測定を行ったところ、活性の存在が確認された。以上から本研究においては広塩性魚類であるウナギの淡水適応時のエラにおいて重要な役割を担うと考えられる新規分子eRBCCの同定に成功した。この分子の働きは、エラの呼吸上皮および塩類細胞の核に局在、ユビキチンリガーゼ活性を有することから、これらの発現部位においてタンパク質の分解の制御を行い、その淡水型への分化への関与と考えられる。

The ability of fish to penetrate fresh water and sea water This paper discusses the relationship between the penetration mechanism of fish and its biological characteristics. In this study, a kind of fish with high molecular weight was studied. The results show that the new RBCC(RING finger-B-box coiled coil) has been successfully established. eRBCC is a high level of development in freshwater, and its tissue development is unique. The time required for the migration of seawater to freshwater was about 6 times that of seawater to freshwater, and the time required for the migration of seawater to freshwater was about 12 times that of seawater to freshwater. In addition, in situ, the analysis of immune tissue staining, the development of respiratory epithelium and permeability, the important role of cellular structure in the development of immune tissue staining, and the development of immune tissue staining. Ring-finger design is the most important part of the report. The presence or absence of the activity of eRBCC is determined by the determination of the activity of eRBCC in vitro. In this study, we successfully identified the new molecule eRBCC. The molecular structure, respiratory epithelium and nuclear structure, activity and development of these molecules are related to the regulation of the decomposition of these molecules and the differentiation of freshwater cells.

项目成果

Kentaro Miyamoto et al.: "RING finger, B-box, and coiled-coil (RBCC) protein expression in branchial epithelial cells of Japanese eel, Anguilla japonica"European Journal of Biochemistry. 269. 6152-6161 (2002)

Kentaro Miyamoto 等人：“日本鳗鲡鳃上皮细胞中的环指、B 盒和卷曲螺旋 (RBCC) 蛋白表达”欧洲生物化学杂志。