生物界由来の低沸点ハロゲン化合物の生成機構とハロゲン元素循環系
生物界低沸点卤素化合物的形成机理及卤元素循环系统
基本信息
- 批准号:12018208
- 负责人:
- 金额:$ 0.83万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
塩素を含むテルペノイドを生産する海藻中のハロペルオキシダーゼについて研究を行い。従来報告されているハロペルオキシダーゼの標準基質であるモノクロロジメドンには全く作用せず、3-メチル-2-ブテン-1-オールに特異的に作用し3-メチル-3-ヒドロキシ-2-ブロモ-1-ブタノールを生成する新規ハロペルオキシダーゼを確認した。本酵素の活性は比較的高く、GCによる酵素活性の簡便な測定法を確立し、酵素の精製を行った。完全精製には至っていないが、本酵素がハロゲン化において厳密な基質特異性を示す始めてのハロペルオキシダーゼであることを確認した。海洋プランクトンPavlova sp.よりS-アデノシルメチオニン(SAM):ハライドイオンメチル転移酵素を完全精製した。同酵素は分子量約29,000のモノマー酵素であり、SAMに特異的であり、SAM以外のS-メチルメチオニン、L-メチオニン、ジメチルスルフォニルプロピオン酸、ベタインには作用しない。ヨウ素イオンに対して最も高い活性を示した。またPavlova sp.より、mRNAを取得し、遺伝子クローニングのためのcDNAライブラリーを作成した。抗生物質の一種であるクロロテトラサイクリンの塩素化を行う酵素遺伝子(chl)をPCR法により増幅しpETベクターに挿入し、大腸菌にて酵素を大量に発現させる系を構築した。その結果、可溶性蛋白の5-10%近く発現させる事に成功した。しかし、本酵素がどの様な反応を触媒するかは明らかにできなかった。
The research on the production of algae containing the elements is carried out. This report confirms that the standard matrix of the new specification is fully functional and 3-MCR-2-MCR-1 - 1-MCR-1 - 1-MCR-1 - 1 MCR-1 - 1 The activity of this enzyme is relatively high, and GC is a simple method for determining enzyme activity. Complete purification of the enzyme to determine the substrate specificity of the enzyme The sea top color is Pavlova sp., S-, S- Isoenzyme molecular weight of about 29,000 It's the best way to get started. Pavlova sp., mRNA, and cDNA were obtained and processed. A kind of antibiotic substance is constructed by PCR method to increase the amplitude of enzyme gene and to construct a system for the production of Escherichia coli enzyme in large quantities. The results, soluble protein 5-10% of the recent success of the event. The enzyme is a catalyst for the reaction.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
伊藤伸哉,大沢登: "生物界由来の揮発性ハロゲン化合物の生成機構と循環"特定領域研究対流圏化学グローバルダイネミクス. 6. 65-70 (2001)
Shinya Ito、Noboru Osawa:“来自生物界的挥发性卤素化合物的生成机制和循环”特殊领域研究对流层化学全球动力学。 6. 65-70 (2001)
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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N.Itoh等人:“来自恶臭假单胞菌的Co 2+ 活化的溴过氧化物酶-酯酶的克隆和生化特征”Biochimica et Biophysicala Acta。
- DOI:
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- 作者:
- 通讯作者:
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