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細胞壁伸展過程の研究;臨界降伏圧(Y)を調節するタンパク質yieldinの分子細胞生物学的解析

细胞壁延伸过程的研究；调节临界屈服压力（Y）的蛋白质yieldin的分子细胞生物学分析

基本信息

批准号：
12037217
负责人：
中里朱根
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Showa Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

Yieldinは、細胞壁が伸びるに必要な最小の力である臨界降伏圧を調節して細胞壁の伸展、ひいては細胞の伸長成長を制御するタンパク質である。2000年に中里(岡本)らによりミトリササゲ細胞壁から単離されたばかりであり、その作用機作はほとんど明らかにされていない。本研究ではミトリササゲ胚軸におけるyieldinのmRNAとタンパク質の分布を検討した。まずササゲ幼植物の伸長成長とyieldin mRNA蓄積量との関係を明らかにするため、3日齢のササゲ黄化芽生え胚軸をhook(H)、rapidly elongating region(RE)、moderately elongating region(ME)、mature region(M)に分け、各部域におけるyieldin mRNAレベルを調べた。各部域からATA法でtotal RNAを抽出し、yieldin cDNAをプローブとしてノザン解析したところ、yieldin発現量はH部域において最も高く、胚軸の基部にいくに従い減少することが明らかとなった。また抗yieldin抗体を用いた免疫及び細胞化学的手法を使い、yieldinのタンパク質レベルでの組織・細胞内分布を検討した。その結果、yieldinはHおよびREに多く存在し、MEやMのような伸長成長が停止しかけているか、停止した部域ではほとんど観察されなかった。さらにHとRE部域においてyieldinは皮層細胞壁に局在した。この結果は前述の結果と同じく、yieldinが軸性器官の伸長成長を行っている部域に局在し細胞の伸長が止まるにつれ存在量が減少することを示すとともに、yieldinが伸長成長の律速要因となっている皮層細胞壁において作用していることを示唆する。今後はin situ hybridization法や免疫電子顕微鏡を用いてyieldinの発現パターンや細胞内分布のより詳細な解析を行いたい。

Yieldin regulates cell wall elongation with the minimum force necessary to control cell wall elongation. In 2000, in the middle of the city (Okamoto), the cell wall was separated from the city wall, and the action mechanism was changed. In this study, we investigated the distribution of yieldin mRNA and protein in the hypocotyl. The relationship between yieldin mRNA accumulation and elongation of young plants was investigated by means of hook(H), rapidly elongating region(RE), moderately elongating region(ME), mature region(M), and yieldin mRNA expression in each domain. Total RNA extracted from each domain, yieldin cDNA extracted from each domain. Anti-yieldin antibodies were detected by immunologic and cytochemical methods, and their distribution in tissues and cells was investigated. As a result, yieldin H and RE exist, ME and M extend and grow, and stop and examine. In addition to the above, there is also a small number of small and medium-sized enterprises. These results are consistent with the results described above. Yieldin plays an important role in the growth and elongation of axial organs. In the future, the in situ hybridization method and immunoelectron microscopy will be used to detect and analyze the intracellular distribution of yieldin in detail.