炎症性腸疾患の病因解明を目的とした腸内細菌導入モデルによる免疫制御機構の解明

利用肠道细菌导入模型阐明免疫控制机制，阐明炎症性肠病的发病机制

• 批准号: 12877186
• 负责人: 佐々木 巌
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877186/
• 关键词: T細胞; 炎症性腸疾患; 腸内細菌

本研究は、常在腸内細菌に対するT細胞を中心とする免疫担当細胞の免疫応答と免疫学的寛容の樹立に至る過程を無菌マウスに腸内細菌を強制定着させるモデルを用いて解析するものであった。前年度の問題点として、T細胞のH^3-thymidine取込みによる増殖試験において、マウス(特に無菌マウス)腸管からの粘膜固有層単核球の分離の問題があったが、試行錯誤をくり返したが結局予定した細胞数は得られなかった。従って、粘膜固有層単核球のサイトカイン分泌においても培養系を構築できず定量化の土俵にのせ得なかった。そこで、laser captureによるmicrodissection法を考慮しあらたに腸内細菌定着実験をやり直しサンプルの採集を行った。それと合わせて次善の策として、腸内細菌強制定着の過程で脾臓より単核球を分離し、無刺激、PHA刺激、LPS刺激の際の培養上清中サイトカイン濃度を検討している。以上のように、標的細胞の収量不足という本研究を施行する上で極めて重要な問題を解決できないという方法論的問題により、十分な成果を挙げることはできなかった。

This study は, often in intestinal bacteria に す seaborne る t-cell を center と す る bear immune cells の immune 応 answer と immunology process of understanding let の establish に to る を sterile マ ウ ス に intestinal bacteria を formulated with さ せ る モ デ ル を with い て parsing す る も の で あ っ た. First annual の problem points と し て, T cells の H ^ 3 - thymidine take 込 み に よ る raised colonization test に お い て, マ ウ ス (especially に sterile マ ウ ス) insufflate か ら の mucosa lamina propria 単 nuclear ball の separation の が あ っ た が, pilot error を く り return し た が ending designated し た cell number は must ら れ な か っ た. 従 っ て, mucosa lamina propria 単 nuclear ball の サ イ ト カ イ ン secretion に お い て も training department を build で き ず quantitative の soil Biao に の せ have な か っ た. そ こ で, laser capture に よ る を microdissection method considering し あ ら た に fixed on intestinal bacteria be 験 を や り straight し サ ン プ ル の gathering line を っ た. そ れ と close わ せ て times good の policy と し て, strong intestinal bacteria develop の process で splenic よ り 単 nuclear ball し を separation, no stimulation, PHA stimulation, LPS stimulation の interstate の culture supernatant of サ イ ト カ イ ン concentration を beg し 検 て い る. Above の よ う に, target cells の enough 収 と い う enforcement of this research を す で extremely on る め て important な を solve で き な い と い う methodological problems に よ り, very な を 挙 げ る こ と は で き な か っ た.