グラフト吻合部狭窄進展機序の解明に関する研究-テネイシン-Cを介するゼラチナーゼB発現を中心に-

阐明移植物吻合处狭窄进展机制的研究 - 聚焦生腱蛋白-C介导的明胶酶 B 的表达 -

• 批准号: 12877201
• 负责人: 小野田 幸治
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877201/
• 关键词: テネイシン-C; グラフト吻合部狭窄; 細胞外マトリックス; 内膜肥厚; 動脈狭窄モデル; 免疫組織化学; 新生内膜; テネイシンC

1.Lewis Ratを用いて、腹部大動脈に同種同系腹部大動脈を移植した後、末梢吻合部に50%絞扼術を追加し、動脈グラフト吻合部狭窄モデルを作製した。術後7、14、28、56日目にグラフトを採取し、Elastica-van Gieson染色にて組織学的検討を行い、同時にグラフトにおけるTenascinC(TN-C)蛋白およびmRNAの発現をそれぞれ免疫染色、in situ hybridizationにて検討した。また、絞扼術を加えない非狭窄モデルについても同様の検討を行った。さらにPDEIII阻害剤であるcilostazol 20mgをグラフトに局所塗布しグラフト狭窄抑制効果を検討した。また培養平滑筋細胞を用いて、cilostazolのTN-C抑制効果について検討した。2.組織学的検討では、狭窄モデル、非狭窄モデル共に、術後14日日よりグラフト末梢吻合部、体部に新生内膜の形成を認めた。内膜/中膜比は、28、56日目で狭窄モデルで有意に高値であった。3.TN-C免疫染色では、グラフト内に特異的にTN-Cの発現を認めた。特に、術後14日目よりグラフト体部、吻合部の新生内膜に一致して、強い発現を認めた。in situ hybridizationでは7日目より中膜に、14日目では新生内膜にmRNAの発現を認めた。これらより、TN-Cがグラフト狭窄進展に関与している可能性が示唆された。4.術後28日目においてcilostazol投与群ではvehicle投与群に比べて内膜/中膜比は有意に低値であり、新生内膜形成の抑制を認めた。またcilostazolは培養平滑筋細胞のTN-C産生を抑制した。以上よりcilostazolは動脈グラフト狭窄の予防に有効であり、作用機序としてTN-C産生抑制が関与している可能性が示唆された。

1. After Lewis Rat was used, the abdominal artery was transplanted into the homologous abdominal artery, a 50% strangulation was added to the distal anastomosis, and the stenosis of the arterial anastomosis was made. At 7, 14, 28, and 56 days after surgery, histological examination was performed by Elastica-van Gieson staining, and Tenascin C (TN-C) protein and mRNA expression was examined by immunostaining and in situ hybridization. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. PDEIII inhibitor 20mg is used to investigate the effect of narrow coating. The effect of inhibition of TN-C on cultured smooth muscle cells was investigated by using cilostazole. 2. Histological examination of neointima formation in distal anastomosis and body at 14 days postoperatively. Intima/media ratio: 28, 56 days narrow, intentionally high 3.TN-C immunostaining was used to detect the specific TN-C expression. In particular, the neointima of the body and anastomosis were identified on the 14th day after operation. In situ hybridization, mRNA expression in tunica media was detected on day 7 and in tunica neointima on day 14. The possibility that TN-C may be involved in narrow progress is also discussed. 4. On the 28th day after surgery, the ratio of intima to media was significantly lower than that of vehicle administration, and the inhibition of neointima formation was recognized. Inhibitory effect of cilostazole on TN-C production in cultured smooth muscle cells The above results indicate that cyclostazol has the potential to inhibit TN-C production in the prevention of arterial stenosis, and the mechanism of action.