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子宮頚がんにおける個性診断DNAチップの開発

宫颈癌人格诊断DNA芯片的研制

基本信息

批准号：
12877266
负责人：
高田全
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

子宮頸がん患者10例、子宮頚部上皮内腫瘍10例よりmicrodissectionによりtotal RNAを抽出し、555種類の遺伝子についてcDNAマクロアレイ解析を行った。対照としておのおのの正常子宮頚部を用いた。その結果、共通の12種類の遺伝子発現変化を見いだした。またcDNAマクロアレイのセットアップとしてシスプラチン感受性、耐性卵巣がん細胞株を用い555種類の遺伝子についてcDNAマクロアレイ解析を行った。その結果、cDNAマクロアレイにおいては細胞株の発現変化の比較の容易さ、再現性といった点より、手術検体を用いる場合はさらなる改善策が必要であることがわかった。手術検体に必要な改善点は保存状態、組織中のheterogeneietyの問題、正常子宮頚部組織といってもその成分はほとんど間質組織であり上皮性子宮頸がんの真のコントロールは正常子宮頚部上皮である点である。現在われわれはRNA laterで保存後、OCTコンパウンドで保存し、Laser Capture Microdissection (LCMD)を用い、正常子宮頚部上皮細胞を1000細胞以上収集し、RNAを抽出、T7 based amplification後cDNAマイクロアレイ解析に供している。早期診断が予後決定に重要な子宮頸がんは細胞診、HPV感染の有無以外に悪性度を遺伝子発現プロフィールで診断する手だてがあれば早期に子宮頸がんの診断に寄与し、さらなる予後改善に貢献できる。今後われわれは子宮頚部異形上皮も含め子宮頸がんもLCMDにより病変のみを回収し、悪性度の診断、早期診断、化学療法剤感受性、耐性の診断、予後の把握、個人に適した治療法の選択に寄与できる遺伝子、EST(expressed sequence tags)をcDNAアレイ解析により明らかにし、子宮頸がんの個性診断オリジナルのcDNAチップまたはフィルターを開発する予定である。

There were 10 cases of ectopic pregnancy, 10 cases of intraepithelial eczema in the fetal region, 10 cases of microdissection, total RNA extraction and 555 cases of intraepithelial ectasia. The clinical data were analyzed. Please tell me that you have a normal child and use it. According to the results of the review, we have realized the implementation of the general information system in the same category. The sensitivity and tolerance of oocytes were not affected by cDNA. The cell lines of oocytes were analyzed by using the same type of cell line, which is similar to that of the cDNA virus. The results showed that it was easier to realize the cell line than the cDNA cell line, and the results showed that it was easier to realize the cell line than the other cell lines, the results showed that it was easier to realize the cell line than the other cell lines. It is necessary to improve the preservation status, the heterogeneiety problem in the tissue, the normal component of the tissue, the epithelium of the tissue, the epithelium of the normal tissue and the normal part of the tissue. Now, after the preservation of RNA later, the preservation of OCT, the use of Laser Capture Microdissection (LCMD), the collection of epithelial cells over 1000 cells of normal offspring, the extraction of RNA, and the analysis of cDNA after T7 based amplification. In the early stage, it was decided that the important child was not infected with HPV, and that there was a degree of sex in patients with HBeAg infection. In the future, the shape of the epithelium of the LCMD disease will be returned, the sex will be broken, the early pregnancy will be broken, the chemical sensitivity, the tolerance will be broken, the future will be grasped, the individual treatment will be selected and sent to the baby, EST (expressed sequence tags) cDNA will analyze the symptoms of the disease, and the results will be clear. The child does not need to perform a sexual interruption. This is not the case. The cDNA is open and scheduled.