細胞の膜流動性は時間的・空間的に変動しているか?

细胞膜流动性随时间和空间变化吗?

基本信息

  • 批准号:
    12878120
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.09万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 2001
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1. Mueller行列を用いた蛍光異方性イメーシンク法の改良脂質二分子膜リポソームでの実験と理論的考察から、通常観測している「蛍光異方性」には、色素の回転拡散に起因する偏光解消の他に、膜部分の複屈折性のために、直線偏光と円偏光の変換に起囚する偏光解消が含まれていることが明らかとなった。この複屈折性の効果は膜の多重性に比例して増大するので、場合によっては、回転拡散による偏光解消と同程度になる。また、通常の分光器による巨視的測定の方が、顕微鏡下での微視的測定より大きく現われる。これまでの膜を対象とした蛍光異方性の測定では、この効果を正しく考慮されているものはなかったため、多くの結果を見直す必要があるかもしれない。我々のMueller行列を用いた方法では、原理的には、円偏光性まで含めて、4×4のMueller行列を扱うことで、ふたつの効果を分離して同時に計測可能である。そのための実装として、昨年度の理論的検討をもとに、試料の4×4のMueller行列測定に必要な偏光を、現在市販されているFLC1/2波長板スイッチ2個と固定1/4波長板の組み合わせで実現しようとしたが、現在のところ、互いに線型独立な良質な偏光状態は取り出せていない。実現には、もう少し時間が必要である。2. 脂質二分子膜リポソームの相分離生成のダイナミクスDMPC/DMPE系の相分離生成過程(高温の液晶状態から低温のゲル状態への冷却過程)を、昨年度開発したビデオレートイメージング法で観察した。その結果、1)急冷した場合には、ほぼ100%相分離は生じない、2)徐冷の場合には、大きな相分離が生成する時としない時がある、3)相分離が生成するか否かは、リポソームの形状とラメラリティに依存している、などが明らかとなった。リポソームの相分離の静的な観察はこれまでにも報告があるが、動的な相分離生成過程を、光学顕微鏡で可視化したのは、世界初である。3. アポトーシス過程での膜流動性変化の観察CHO細胞を用いて、過酸化水素で誘導したアポトーシス過程での、膜流動性変化を観察した。過酸化水素処理時間に応じて、種々のアポトーシスの指(Caspase3活性〜6時間、DNAラダー〜12時間、核の形態変化〜24時間)が変化したが、膜流動性の変化はそれらより早く現われ、処理開始直後に流動性の低下が起こり始め、2時間で変化は完了した。ただし、この変化は、過酸化水素が直接的に膜に作用して引き起こしている可能性もあるため、アポトーシスとの関連については、更に検討が必要である。
1. Mueller ranks を with い た 蛍 light square difference イ メ ー シ ン の ク method improved lipid second molecular membrane リ ポ ソ ー ム で の be 験 と theory investigation か ら, usually 観 し て い る "蛍 clean vision" に は, pigment の back planning company, scattered に cause す る polarized solution away の his に, membrane partial の after inflectional の た め に, linear polarization と has drifted back towards &yen; polarized の variations in に up prison す る slant Photolysis dispels が containing まれて る る とが とが light ら となった となった となった. こ の after inflectional sex の unseen fruit は membrane の multiplicity に proportion し て raised large す る の で, occasion に よ っ て は, back to the planning company, scattered に よ る と elimination with polarized solution degree に な る. Youdaoplaceholder0. Generally, the measurement of the macroscopic vision of a <s:1> spectrometer による is based on the <s:1> method of が, and the measurement of the で microscopic vision under a 顕 micromicroscope is based on the よ large く く result of われる. こ れ ま で の membrane を like と seaborne し た 蛍 clean different sex determination of の で は, こ の is sharper fruit を し く consider さ れ て い る も の は な か っ た た め, multiple く の results を see straight す necessary が あ る か も し れ な い. I 々 の Mueller ranks を with い た method で は, principle of に は, has drifted back towards &yen; polarizing ま で containing め て の Mueller, 4 * 4 ranks を Cha う こ と で, ふ た つ の unseen fruit を separation し て simultaneously に measuring may で あ る. そ の た め の be loaded と し て, yesterday of annual の theory 検 を も と に, try の の Mueller category 4 * 4 determination に necessary な polarization を, now selling さ れ て い る FLC1/2 wavelength plate ス イ ッ チ 2 と a quarter wavelength plate fixed の group み close わ せ で be presently し よ う と し た が, now の と こ ろ, mutual い に linear independent な good qualitative な slant The state of light せて is taken as な to obtain せて せて な な. The actual occurrence is に う, う う less than <s:1> time が necessary である. 2. Lipid second molecular membrane リ ポ ソ ー ム の phase separation generated の ダ イ ナ ミ ク ス DMPC/DMPE の separate generation process (high temperature の LCD status か ら cryogenic の ゲ ル state へ の cooling process) を, yesterday's annual 発 し た ビ デ オ レ ー ト イ メ ー ジ ン グ method で 観 examine し た. そ の results, 1) quenching し た occasions に は, ほ ぼ 100% phase separation は raw じ な い, 2) xu cold の に は, big き な phase separation が generated す る when と し な い when が あ る, 3) phase separation が generated す る か no か は, リ ポ ソ ー ム の shape と ラ メ ラ リ テ ィ に dependent し て い る, な ど が Ming ら か と な っ た. リ ポ ソ ー ム の の static phase separation な 観 examine は こ れ ま で に も report が あ る が, dynamic process of separating the な generated を, optical 顕 micromirror で visualization し た の は, at the beginning of the world で あ る. 3. ア ポ ト ー シ ス process で の membrane fluidity - turn の 観 examine CHO cells を using い て, acidic water element で induced し た ア ポ ト ー シ ス process で の, membrane fluidity - を 観 examine し た. Acidification of water element 処 manage time に 応 じ て, kind of 々 の ア ポ ト ー シ ス の refers to (~ 6 Caspase3 activity time, DNA ラ ダ ー ~ 12 time, nuclear の form - to 24) が variations change し た が, membrane fluidity の variations change は そ れ ら よ り early く now わ れ, 処 began to straight after low liquidity に の が こ り め, 2 time で - は finished Youdaoplaceholder0 た. た だ し, こ の water element が acidification passes - は, direct に membrane に effect し て lead き up こ し て い る possibility も あ る た め, ア ポ ト ー シ ス と の masato even に つ い て は, more に beg が 検 necessary で あ る.

项目成果

期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
S.Tsuchiya: "Video-rate Imaging of membrane fluidity of phospholipid bilayer during phase transition"Proceedings of 4th International Conference on Biological Physics. 1. 33-33 (2001)
S.Tsuchiya:“相变期间磷脂双层膜流动性的视频速率成像”第四届国际生物物理会议论文集。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
A.Goto: "Mueller matrix measurements in fluorescence polarization microscopy : imaging of membrane fluidity and orientation of the dye"Proceedings of 4th International Conference on Biological Physics. 1. 33-33 (2001)
A.Goto:“荧光偏振显微镜中的穆勒矩阵测量:膜流动性和染料方向的成像”第四届国际生物物理会议论文集。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
T.Kiuchi: "Microscopic imaging of membrane fluidity in PC12D cells during neuronal differentiation using environment-sensitive dye Laurdan"Proceedings of 4th International Conference on Biological Physics. 1. 33-33 (2001)
T.Kiuchi:“使用环境敏感染料 Laurdan 对神经元分化过程中 PC12D 细胞膜流动性进行显微成像”第四届国际生物物理会议论文集。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
後藤 晃: "ミューラー行列を用いた蛍光偏光イメージング"光学. 31・6. ??-?? (2002)
后藤晃:“使用穆勒矩阵的荧光偏振成像”光学31・6。
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    0
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    大木 和夫
メリチンが誘導するPC膜とPE膜の膜物性変化の比較
蜂毒肽引起PC膜和PE膜物理性能变化的比较
  • DOI:
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    2007
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  • 通讯作者:
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    Grant-in-Aid for Exploratory Research

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    63750622
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    1988
  • 资助金额:
    $ 1.09万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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