MLK2とセプチンによる神経細胞の開口分泌制御機構の解明

阐明 MLK2 和 septin 的神经元胞吐控制机制

• 批准号: 01J01723
• 负责人: 河尻 愛恵
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J01723/
• 关键词: セプチン; シグナル伝達; 生化学

セプチンは種を越えて保存されている分子量4-8万の蛋白質群で、構造上GTP/GDP結合部位を有する広義の"G蛋白質"である。セプチンは神経情報伝達機構において神経伝達物質の放出に関与する分子の一つと考えられている一方、下等動物細胞での遺伝学的解析では細胞質分裂や極性の決定に必須であることが報告されている。私共は、Mixed Lineage Leukemiaの融合蛋白質として同定された哺乳動物セプチンSept9/MSFファミリー(Sept9a/MSF-A,Sept9b/MSF,Sept9c/MSF-B)の性状解析を行った。Sept9/MSFファミリーの特異抗体を作成して種々の培養細胞におけるMSFファミリーの発現を検討したところMSFファミリーは微小管に沿ったフィラメント様の局在を示すことがわかった。培養細胞のうちヒト乳腺細胞HMECではSept9a/MSF-Aのみが発現していることを見い出した。この細胞における細胞内局在を検討したところ間期において微小管に沿った局在が、分裂期には紡錘体・分裂溝への濃縮が観察された。また生化学的解析によりSept9a/MSF-AのGTP水解領域を含む中心領域が微小管と直接結合することが示された。しかし、GTP水解能の有無は結合に影響しなかった。また、細胞からSept9a/MSF-Aを含む内在性セプチン複合体を免疫沈降した際にチュブリンの共沈が認められた。さらに、コルセミドで微小管構築を崩壊させるとSept9a/MSF-Aの繊維状構造も崩壊した。一方、RNAiを用いてHMEC細胞内のSept9a/MSF-Aの蛋白質量を減少させると細胞質分裂が阻害され、多核の細胞が出現した。これらの結果は、MSFが微小管の機能・構築制御を通して細胞質分裂に関与することを示唆する。

The protein group with molecular weight of 40-80,000 and the GTP/GDP binding site were labeled with "G protein protein". The authorities have reached the conclusion that they have reached the conclusion that they have released the drugs and molecules in the first place, and that the analysis of the biology of the animals in the first place and in the lower class has determined that it is necessary to make reports and reports on the animals. Cohort, Mixed Lineage Leukemia, fusion protein, breast-feeding animal, breast-feeding animal, Sept9/MSF, breast-feeding animal, breast-feeding animal, breast-feeding animal The specific antibodies against Sept9/MSF were made into several kinds of cell culture cells. The MSF cell was used to detect the microtubule in the MSF cell. The HMEC cells, the Sept9a/MSF-A cells, the breast cells and the breast cells. The microtubule is located in the microtubule along the microtubule, and the body division is observed during the division period. Sept9a/MSF-An analysis of biochemistry the field of GTP hydrolysis contains the central field of microtubule direct combination of microtubes and microtubes. The hydrolysis of GTP can be combined with the hydrolysis of sodium hydroxide and sodium hydroxide. Cell Sept9a/MSF-A contains internal immune complex, immune deposition, immune deposition, and co-precipitation. The microtubule is cracked, the Sept9a/MSF-An is cracked, the collapse is made. On the one hand, RNAi uses HMEC intracellular Sept9a/MSF-A protein to reduce cell division and block cell division, while multinucleate cells appear. The results show that the MSF microtube machine can control the cleavage and instigation of cell division.

项目成果

Koh-ichi Nagata et al.: "Filament formation of MSF-A, a mammalian septin, in mammary HMEC cells depends on interactions with microtubules"Journal of Biological Chemistry. 278. 18538-18543 (2003)

Koh-ichi Nagata 等人：“在乳腺 HMEC 细胞中，MSF-A（一种哺乳动物脓蛋白）的细丝形成取决于与微管的相互作用”《生物化学杂志》。

河尻愛恵, 稲垣昌樹: "タンパク質修飾(リン酸化、アセチル化、メチル化)/わかる実験医学シリーズ;タンパク質がわかる"羊土社. 75-83 (2003)

川尻爱惠、稻垣正树：“蛋白质修饰（磷酸化、乙酰化、甲基化）/理解实验医学系列；理解蛋白质”Yodosha 75-83（2003）。

Hidemasa Goto et al.: "Aurora-B regulates the cleavage furrow-specific vimentin phosphorylation in the cytokinetic process"The Journal of Biological Chemistry. 278・10. 8526-8530 (2003)

Hidemasa Goto 等人：“Aurora-B 调节细胞分裂过程中的裂解沟特异性波形蛋白磷酸化”《生物化学杂志》278・10（2003）。

Minoshima Yukinori et al.: "Aurora B Phosphorylates MgcRacGAP and Induces RhoGAP Activity during M Phase : Identification of a RhoGAP Indispensable for Cytokinesis"Developmental Cell. (in press). (2003)

Minoshima Yukinori 等人：“Aurora B 磷酸化 MgcRacGAP 并在 M 期诱导 RhoGAP 活性：鉴定细胞分裂所必需的 RhoGAP”发育细胞。

Yukinori Minoshima et al.: "Aurora B Phosphorylates MgcRacGAP and Induces RhoGAP Activity during M Phase : Identification of a RhoGAP Indispensable for Cytokinesis"Developmental Cell. 4. 54-60 (2003)

Yukinori Minoshima 等人：“Aurora B 磷酸化 MgcRacGAP 并在 M 期诱导 RhoGAP 活性：鉴定细胞分裂所必需的 RhoGAP”发育细胞。