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放線菌における二次代謝及び形態分化の制御機構の解明

放线菌次生代谢和形态分化控制机制的阐明

基本信息

批准号：
01J05842
负责人：
山崎美佳
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

1.AdpAレギュロンの解明:放線菌Streptomyces griseusは自身の生産する微生物ホルモンA-ファクターによって転写因子AdpAの発現を促し、二次代謝と形態分化を導く。胞子形成時の隔壁形成に必須な遺伝子ssgAは、AdpA依存的に転写活性化され、AdpAが転写開始点の-235位、-110位、+60位の3カ所に結合していた。結合部位への変異導入解析の結果、ssgAの転写活性化および気中菌糸への隔壁形成には-235位、-110位の2カ所の結合部位がともに必須であった。以上の成果は学術雑誌J.Bacteriol.(2003)に掲載された。また、放線菌属に共通した気中菌糸形成開始の最終決定因子をコードするamfRもAdpAによって転写活性化されることを見出した。AdpA結合領域は転写開始点の-200位および-60位の2カ所であり、これら結合領域に変異を導入するとamfRの転写量は減少し、気中菌糸形成が遅れた。この形質は-60位の変異においてより際立っていた。この成果は現在投稿準備中である。2.AdpAの機能解析:AdpAレギュロンに属する遺伝子adsA、ssgA、amfRの計5カ所のAdpA結合領域についてU置換、T除去、GA除去の3種の干渉フットプリント解析を行い、AdpA結合に必須な塩基を同定し、その結果からAdpAのDNA結合コンセンサス配列CRRRAX_<3-4>GCCA(R: G or A, X : anynucleotide)を明らかにした。この成果は現在投稿準備中である。さらに大腸菌から精製したAdpAとS.griseusから精製したRNAポリメラーゼホロ酵素を用い、AdpAレギュロンに属する遺伝子群について過マンガン酸カリウムを用いたフットプリント解析を行い、RMポリメラーゼによるプロモーター領域の開鎖複合体形成にAdpAが必須であることを明らかにした。

1.AdpA bacteria: Streptomyces griseus bacteria, microorganisms, microorganisms, A-bacteria, microorganisms, microorganisms At the time of cell formation, it is necessary to change the ssgA in the next door, to activate the AdpA-dependent write, and to combine the starting point of the AdpA with the starting point of-235,110and + 60 bits. The results of the analysis of the results of the combination site were analyzed, and the results of ssgA analysis showed that the bacteria in the next door of the active virus were formed in the next door, and the combination of position-235and-110had to be confirmed. The above achievements are published in the academic Journal J.Bacteriol. (2003). Actinomycetes and actinomycetes are the most important determinants at the beginning of the formation of bacteria in the common genus of actinomycetes and actinomycetes. The most important determining factor is the activation of amfR bacteria. AdpA combines the field reading starting point-200bit reading-60-bit reading system, and the combination of the field reading system to input the amfR data to reduce the amount of writing, and to form the system of bacteria in the system. The shape of the car-60 bits of the car. The results are now being prepared for submission. 2.AdpA machine analysis: AdpAbs are in the same category as adsA, ssgA, and amfR. The combination of AdpA and field data sets, T removal, GA removal, AdpA analysis, AdpA binding must be based on the same definition, and the results show that CRRRAX_<3-4&gt must be configured in the combination of ADPA and DNA. GCCA (R: G or A, X: anynucleotide). The results are now being prepared for submission. In this paper, we use the method of AdpA, S.griseus, RNA, AdpA, AdpA, and so on. In this way, we need to analyze the data in the field of AdpA, and we need to know that it is necessary to form a complex in the field.