Chondromodulin-Iによる胚の血管系パターンの形成の制御

软骨调节蛋白-I 对胚胎脉管系统模式形成的调节

基本信息

批准号：
01J60052
负责人：
西崎有利子
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

Chondromodulin-I (ChM-I)は、血管内皮細胞の増殖を阻害する活性を指標にしてウシ胎仔軟骨から精製された分子量約25KDの分泌性の糖タンパク因子である。哺乳類では、ChM-Iは関節軟骨及び軟骨性骨原基の静止層、増殖層、前肥大化層にかけて軟骨特異的に発現し、脱灰骨基質により異所的に誘導される軟骨への血管侵入を抑制する。本研究では、ChM-Iの役割を明らかにする目的で、メダカ(Olyzias latipes) ChM-I cDNAのクローニングと定量的PCR及びin situ hybridizationによるmRNAの発現解析を行った。孵化後7日目のメダカから抽出したRNAを用いて、RACE法によりメダカChM-I cDNAのクローニングを行った。メダカChM-Iは316アミノ酸残基からなる前駆体をコードし、furin認識配列であるRKRRで切断されC末端103アミノ酸残基が成熟蛋白として分泌されると推測された。成熟ChM-IのC末端の血管新生抑制ドメインに存在する8つのシステイン残基の位置は哺乳類から魚類まで完全に一致しており、マウスChM-Iのアミノ酸配列と比較すると68%の相同性を示した。メダカChM-Iは後期胞胚期以降から発現し、孵化直前まで発現量は上昇し、孵化後に減少した。メダカChM-Iの発現は、頭蓋軟骨原基のみならず、脊索、後脳、耳胞に検出された。脊索においては4体節期から発現が検出され、17体節期まで増強が続いた後、体節の血流が開始する頃に発現が減少した。後脳における発現は体節形成の直前に帯状に検出された。4体節基には、耳胞原基が形成される後脳の左右両側でのみ発現し、その後、発現が増強して耳胞に限局した。血管への蛍光色素の注入によって、耳胞は血管が乏しく、血管の走行も限定されている組織であることが明らかになった。

软骨瘤蛋白-I（CHM-I）是一种分泌性糖蛋白因子，其分子量约为25 kD，从胎儿牛软骨纯化，使用其活性抑制了血管内皮细胞的增殖作为指示。在哺乳动物中，CHM-I通过关节软骨和软骨骨原发性的静息，增殖和腹膜前层特异性表达，并通过脱水骨基质抑制异位诱导的血管侵袭到软骨中。在这项研究中，我们通过定量PCR和原位杂交对Olyzias latipes进行了CHM-I CDNA的克隆，并分析了mRNA表达，目的是阐明CHM-I的作用。 Medaka CHM-1 cDNA通过种族方法克隆了孵化后第7天从Medaka提取的RNA。 MEDAKA CHM-I编码由316个氨基酸残基组成的前体，并被怀疑用FURIN识别序列RKRR裂解，并且C-末端103氨基酸残基被分泌为成熟蛋白。在成熟CHM-I的C-末端中存在的八个半胱氨酸残基的位置完全一致，与哺乳动物相比，与小鼠CHM-I的氨基酸序列相比，有68％的同源性。 Medaka CHM-I从胚泡后期表达，并增加到孵化前，并在孵化后减少。 Medaka CHM-I的表达不仅在颅骨原始中被检测到，而且在脊索，后脑和耳侧囊泡中也被检测到。在脊索中，在四个somotonic阶段中检测到表达，在增强阶段至17个somotonic阶段之后，当索托型血流开始时表达降低。在体系形成之前，在频带中检测到后脑中的表达。这四个屈服者仅在形成耳鼻喉原始的后脑两侧表达，然后增强表达并将其定位于耳托。将荧光染料注射到血管中表明，耳叶组织是血管不良且行进量有限的组织。

项目成果

期刊论文数量（2）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Nakamichi Y et al.: "Chondromodulin-I is a bone remodeling factor"Molecular Cellular Biology. 23(2). 636-644 (2003)

Nakamichi Y 等人：“软骨调节蛋白-I 是一种骨重塑因子”分子细胞生物学。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Keigo Setoguchi, Yoshikata Misaki, Kimito Kawahata, Kota Shimada, Takuo Juji, Sakae Tanaka, Hiromi Oda, Chisa Shukunami, Yuriko Nishizaki, Yuji Hiraki, Kazuhiko Yamamoto: "Suppression of T Cell responses by chondromodulin I, a Cartilage-Derived Angiogenes

Keigo Setoguchi、Yoshikata Misaki、Kimito Kawahata、Kota Shimada、Takuo Juji、Sakae Tanaka、Hiromi Oda、Chisa Shukunami、Yuriko Nishizaki、Yuji Hiraki、Kazuhiko Yamamoto：“软骨调节素 I（一种软骨来源的血管生成素）对 T 细胞反应的抑制