マウス着床モデルを用いた免疫系細胞による胚着床促進機構の解析

利用小鼠着床模型分析免疫系统细胞促进胚胎着床的机制

• 批准号: 12671594
• 负责人: 中山 貴弘
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12671594/
• 关键词: 免疫担当細胞; 着床; 胚盤胞; 妊娠; マウス; HB-EGF; LIF; 浸潤

1.妊娠マウスにおける末梢血免疫担当細胞の着床胚に対する発育促進作用を解析する目的で、マウス胚盤胞を細胞外器質より成るマトリゲル上に配置し、さらにマウス脾臓細胞を様々な細胞濃度でマトリゲル外側に配置し、共培養を行った。これにより脾臓細胞由来液性因子のマウス胚盤胞の進展や浸潤に及ぼす作用を検討した結果、非妊娠時および妊娠時の脾臓細胞との共培養によりマトリゲル上でのマウス胚盤胞の進展や浸潤は有意に促進された。また、この促進効果は妊娠時の脾臓細胞でより顕著であり、細胞濃度依存性に増強される傾向が認められた。2.偽妊娠およびDelayed implantation状態のRecipient ICR系マウスに、妊娠マウス脾臓細胞を胚移植とともに静脈内に投与すると、Recipient子宮が着床許容状態となり、移植胚の着床が成立することを報告したが、この機序を解明するため着床期の子宮での発現が報告されている着床関連物質のmRNA発現の妊娠マウス脾臓細胞投与による変化を、Northern blotting法により時間経過を追って検討した。検討した物質は子宮内腔上皮のマーカーとしてMuc-1およびHB-EGF、腺上皮のマーカーとしてLIF、間質のマーカーとしてCOX-2であり、HB-EGF、LIFおよびCOX-2の発現が妊娠マウス脾臓細胞投与により誘導されることが明らかとなった。3.現在、上記実験系において子宮における形態学的変化と着床関連物質の発現部位とをHE染色および免疫組織化学染色法を用いて検討し、妊娠脾臓細胞投与による着床時期の変化を形態学的に確認している。またFITCラベルした脾臓細胞を静注後に子宮を摘出して蛍光顕微鏡下に観察し、投与細胞の子宮内における動態を検討中である。

1. Analysis of the embryonic implantation-promoting effect of peripheral blood immune-responsible cells of pregnancy, purpose of pregnancy, and extracellular organ of embryonic disc cells The quality of the cells was determined by the configuration of the upper part of the material, the configuration of the spleen cells by the spleen cells was determined by the cell concentration and the configuration of the outer part of the co-culture system.これによりSplenocytes origin of fluid factor のマウスblastoderm cells のinfiltration に and ぼす function を検したresult, non-pregnancy おDuring pregnancy, the co-culture of spleen cells and blastoderm cells on the splenic plate can promote the infiltration of the blastoderm cells intentionally. The promotion effect of spleen cells during pregnancy is strong and strong, and the cell density is dependent on the density of the cells. 2. PseudopregnancyおよびDelayed implantation stateのRecipient ICR Department of Masayoshi, Pregnancy Masayoshi Spleen Cell Embryo Transplantation, Intravenous Injection, Recipient Uterine Implantation Permissive Status, and Transplanted Embryo Implantation Establishment Report The report of the implantation period of the uterus and the appearance of the implantation period Pregnant maize spleen cells administered with the substance of mRNA expression, Northern The blotting method is based on time and time.検说した物はuterine cavity epitheliumのマーカーとしてMuc-1およびH B-EGF, glandular epithelial epithelium LIF, interstitial epithelial epithelium COX-2 であり, HB-EGF, LIF およびCOX-2 の発成がPregnant マウス spleen cells were administered and induced されることが明らかとなった. 3. Now, the above mentioned changes in the morphology of the uterus, implantation-related substances, and HE staining of the site where implantation-related substances are present Immunohistochemistry staining method is used to confirm the morphological changes of the pregnant spleen cells during the implantation period. After intravenous injection of FITC spleen cells, they were removed from the uterus and examined under a microscope, and the injected cells were dynamically examined in the uterus.

项目成果

Tatsumi K, et al.: "Induction of tryptophan 2,3-dioxygenase in the mouse endometrium during implantation."Biochem.Biophys.Res.Commmun. 274・1. 166-170 (2000)

Tatsumi K等人：“植入期间小鼠子宫内膜中色氨酸2,3-双加氧酶的诱导”。Biochem.Biophys.Res.Commmun.274·1(2000)。

Tatsumi K et al.: "Expression of Ly-6A/E in the mouse uterus during implantation period"Mol Reprod Dev. 58・2. 159-165 (2001)

Tatsumi K等：“植入期间小鼠子宫中Ly-6A/E的表达”Mol Reprod Dev. 159-165 (2001)。