形態形成機構の基本原理の解明を目指した,ニワトリに内耳の発生機構の解析

分析鸡内耳发育机制，阐明形态发生机制的基本原理

• 批准号: 13045002
• 负责人: 舟橋 淳一
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13045002/
• 关键词: エレクトロポレーション; 蝸牛; トレーシング; GFP; レトロウィルスベクター; 発生運命系譜

●ニワトリ胚内耳原基への遺伝子導入法の開発細胞トレーシングのためにGFP遺伝子を内耳原基である耳胞へ導入する必要がある.このため局所導入エレクトロポレーションを応用し,耳胞へGFP遺伝子を導入した.その結果,継時的に蛍光を観察することに成功した.さらにエレクトロポレーションの条件を検討し,導入効率は約20%程までに高まった.トレーシングには十分な値である.●耳胞(蝸牛)の発生運命系譜の解明蛍光色素の注入による細胞系譜のトレースを行った結果,予定リンパ管領域は,過去の報告より広いことが明らかになった.今後解析を進めることで,さらに詳しい細胞系譜が書けると期待できる.●長期間のトレース一般にエレクトロポレーションには一過性の発現ベクターが用いられるが,本課題の目的には,より長期間にわたって導入遺伝子の発現が持続する系が必要である.そこで,次の二つの改良を行った.一つは,導入するGFP自体の細胞に対する毒性を下げることで,汎用されるEGFPの代わりに,ウミシイタケ由来のphrGFPを用いた.第2はベクターの変更である.プラスミドベクターに換えて,ニワトリレトロウィルスベクターにphrGFPを組み込み,エレクトロポレーションすることにした.これらにより,長期間にわたり安定したGFPの発現を観察し続けることが出来るようになった.現時点で,導入後最長7日後までGFPの蛍光が観察できている.

The primordia of the inner ear of the embryo were introduced into the cell, the primordia of the inner ear, the primor Please tell me that the local office is not in the market, so that you can use it, and the ear cell will GFP you. According to the results of the test, the light detection system was successful. The admission rate is about 20%, and the rate is very high. This is very important. The ear cell (cow) is the key to understand that the light pigment is injected into the cell system. The results of the experiment are as follows: the field of the system is determined, and the information is known by the report. In the future, we will analyze the situation in the future, and we are looking forward to it. For a long period of time, it is necessary to make a long-term impact on the performance of the system. Make sure that you don't know how to improve your performance. As soon as you enter the GFP autologous cell, under the toxicity, use the EGFP to replace the poison, and use the phrGFP to replace the poison. On the second day of the week, there was a lot of trouble. I don't know what to do. I don't know. I don't know, I don't know. For a long period of time, after a long period of time, you can see that there is a lot of money coming out of the market for a long time. The time will be available, and the maximum of 7 days after import will be available for GFP monitoring and monitoring.

项目成果

Nakamura H, Funahashi J: "Introduction of DNA into chick embryos by in ovo electroporation"Methods. 2001. 1, May, 24. 43-48 (2001)

Nakamura H、Funahashi J：“通过卵内电穿孔将 DNA 引入鸡胚”方法。