二倍体アフリカツメガエルを用いた眼形成の遺伝子カスケードの解析

使用二倍体非洲爪蟾眼睛形成的遗传级联分析

• 批准号: 13202039
• 负责人: 安田 國雄
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13202039/
• 关键词: MafB; L-Maf; 水晶体; クリスタリン; トランスジェニックカエル; 不等分裂; 水晶体上皮; 水晶体繊維

1.MafBとL-Mafに対してMorphorino Oligonucleotiges(MO)を合成し、それぞれの遺伝子機能を阻害した。MafBのMOは、水晶体が完全に喪失し、水腫体形成が見られなかった。L-MafのMOは、水晶体が完全に喪失する表現型から、上皮細胞の塊が観察される個体までの表現形が見られた。しかし、9-クリスタリンの発現はほとんど検出できなかった。2.水晶体特異的なエンハンサーの下流にMafBあるいはL-Mafを連結した遺伝子を導入したトランスジェニックカエルを作成し、眼形成過程を調べた。MafBの場合には、續迯ラ胞が増殖した水晶体が観察され、L-Mafの場合には、ほとんどの細胞が繊維細胞に分化していた。3.MafBとL-Mafに対する抗体を作成し、水晶体形成過程での発現を調べた結果、水晶体胞が形成されるまでは、両タンパク質が検出されたが、水晶体胞が形成されると、MafBとL-Mafを発現する細胞は赤道面の細胞に局在し、上皮細胞ではMafBが、線維細胞ではL-Mafだけの発現が観察された。また、分裂中期のマーカーであるリン酸化ヒストンH3の抗体で染色される細胞は、赤道面に局在していた。これらの結果は、赤道面で不等分裂が起きていることを示している。アニマルキャップアッセイにより、DNAマイクロアレイに用いるプローブを作成し、現在カリフォルニア大学の研究者と共同研究を行っている。

1.MafBとL-Mafに inhibits the <s:1> and それぞれ cultural heritage 伝 functions を against the てMorphorino Oligonucleotiges(MO)を and hinders the た. MafB <s:1> MO に, complete に loss of the lens が, and formation of edematous bodies が see られな った った. L - Maf の MO は, crystalline が に completely lose す る phenotype か ら, epithelial cells の が 観 examine さ れ ま る individual で の performance form が see ら れ た. し か し, 9 - ク リ ス タ リ ン の 発 now は ほ と ん ど 検 out で き な か っ た. 2. The crystalline specific な エ ン ハ ン サ ー の obscene に MafB あ る い は L - Maf を link し た heritage 伝 son を import し た ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク カ エ ル を made し, eye forming process を べ た. MafB の occasions に は, renew 迯 ラ cell が raised colonization し た crystalline が 観 examine さ れ, L - Maf の occasions に は, ほ と ん ど の cells が 繊 d cells に し て い た. 3. MafB と L - Maf に す seaborne る antibody を make し, crystalline formation で の 発 now を adjustable べ た result, the crystalline cell が formation さ れ る ま で は, struck タ ン パ ク qualitative が 検 out さ れ た が, the crystalline cell が formation さ れ る と, MafB と L - Maf を 発 now す る cells は equatorial plane に bureau in し の cells, epithelial cells で は MafB Youdaoplaceholder0, linear cells で で L-Mafだけ, が観 observation された. Mid ま た, divided の マ ー カ ー で あ る リ ン acidification ヒ ス ト ン H3 で の antibody staining さ れ る cell は, equatorial plane に bureau in し て い た. The results of <s:1> and れら are unequal, and the equatorial plane で splits が. The が て る る とを とを とを shows that the て て る る る shows that the とを and the で are not equal. ア ニ マ ル キ ャ ッ プ ア ッ セ イ に よ り, DNA マ イ ク ロ ア レ イ に with い る プ ロ ー ブ を make し, now カ リ フ ォ ル ニ の ア university researchers と common line を っ て い る.

项目成果

Kajihara, M., Kawauchi, S., Kobayashi, M., Ogino, H., Takahashi, S., Yasuda, K.: "Isolation, characterization and expression analysis of zebrafish large Mafs"J. Biochem.. 129. 139-146 (2001)

Kajihara, M.、Kawauchi, S.、Kobayashi, M.、Ogino, H.、Takahashi, S.、Yasuda, K.：“斑马鱼大型 Maf 的分离、表征和表达分析”J。