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ヒト神経幹細胞の解析によるニューロン分化機構の解明

通过分析人神经干细胞阐明神经元分化机制

基本信息

批准号：
13210077
负责人：
高橋政代
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々は過去に成体ラット脳由来の神経幹細胞網膜に移植し生着と神経への分化を確認した。しかし、網膜神経の分化に最適な環境である胎児網膜に移植しても脳由来の神経幹細胞から視細胞を分化誘導することはできなかった。そこで、眼球組織から神経幹細胞/神経前駆細胞を海馬由来神経幹細胞と同様の条件で培養した。ラット胎児網膜からは効率よく視細胞に分化する神経前駆細胞がneurosphereの形で得られた。また、成体ラットの毛様体色素上皮や虹彩上皮を同様の条件で培養して分裂増殖する神経前駆細胞を得、さらに視細胞に特異的なホメオボックス遺伝子を導入することによって視細胞のマーカーであるロドプシンやリカバリンを発現させることができた。海馬由来神経幹細胞ではロドプシンの発現はみられなかった。次いで京都大学医の倫理委員会の承認を受けて、ヒト胎児脳および網膜から神経幹細胞/神経前駆細胞を培養した。ヒト胎児脳からは神経幹細胞のクローンが得られ、網膜からはneurosphere法にて神経前駆細胞が得られた。それぞれ神経およびグリアに分化する多分化能を有することが確認された。また、ラット虹彩細胞と同様にヒト虹彩細胞からも視細胞様細胞が分化するか確認するため、通常の緑内障手術で廃棄される虹彩組織を用いて虹彩上皮細胞の培養を行い、ヒトでも虹彩上皮細胞の培養増殖が可能となった。ラットで神経幹細胞が組織特異性を示したのと同様にヒト胎児脳由来の神経幹細胞も前脳、中脳、菱脳それぞれの由来によって分化してくる神経のphenotypeや発現している遺伝子に差がみられ、組織特異性があると考えられた。

We have confirmed the origin of neural stem cell transplantation and neural differentiation in the past. The most suitable environment for retinal differentiation is fetal retinal transplantation. In addition, ocular tissue, neurostem cells and hippocampus derived neurostem cells were cultured under the same conditions. The fetal retina is divided into two groups: the neurosphere and the neurosphere. Under the same conditions, adult hair pigment epithelium and iridescent epithelium were cultured, and the cells were divided and propagated. The cells were introduced into the cells. Hippocampus-derived neural stem cells develop in response to changes in the brain. Second, the Kyoto University Medical Ethics Committee recognized the importance of fetal and retinal stem cell culture. The embryonic stem cells were obtained by the neurosphere method, and the retinal stem cells were obtained by the neurosphere method. The first is to recognize the existence of a multi-dimensional structure. The culture of iridescent epithelial cells and the proliferation of iridescent epithelial cells can be confirmed by the differentiation of iridescent cells and visual cells in common cataract surgery. The origin of stem cells from different tissues is different from the origin of stem cells from different tissues.