キメラ抗体と抗癌剤の複合体の抗腫瘍効果増強と癌細胞の遺伝子レベルの機能変化の解析

嵌合抗体与抗癌药物复合物的抗肿瘤作用增强及癌细胞基因水平功能变化分析

• 批准号: 13218138
• 负责人: 山口 俊晴
• 金额: $ 4.61万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218138/
• 关键词: キメラ抗体; 抗癌剤; 免疫複合体; 遺伝子変化; 接着分子; 胃癌; 抗腫瘍効果; 併用療法

●キメラ抗体の作製と複合体の合成:A7キメラ抗体を遺伝子組み替え酵母培養液から精製した。分子量4万のデキストランと抗癌剤(ネオカルチノスタチン、マイトマイシンC、アドリアマイシン)との結合体を合成し、抗体と架橋剤を用いて結合し複合体を合成した。その抗体活性および、抗癌活性がほぼ100%保持されていることを確認した。●抗体と抗原分子との結合に伴う細胞の機能変化の解析:抗体とともに癌細胞を培養することで、その増殖パターンや形態学的な変化を検討したところ、抗体の添加によりシャーレに付着した癌細胞は剥離する傾向を示し、形態学的にも非添加群に比較して球状に近い形態を示した。しかし、遺伝子レベルにおける増殖因子に関連した遺伝子変化は証明できなかった。蛋白レベルでは、接着因子の発現が抗体添加群でやや増強されたが、有意の差は認められなかった。●抗癌剤との至適組合わせの検討:A7と併用することで、ネオカルチノスタチン、マイトマイシンC、アドリアマイシン、シスプラチンなどはいずれも抗腫瘍効果は増強されたが、5-FU等の代謝拮抗剤ではその様な効果は認められなかった。●ネオカルチノスタチンと結合したデキストランとキメラ抗体との複合体の効果の検討:複合体単独、抗体単独、抗癌剤単独、抗体と抗癌剤の併用の4つの群に分けて抗腫瘍効果を検討した。標的癌細胞としてA7認識抗原の発現されている胃癌培養癌細胞株MKN45を使用した。最も高い抗腫瘍効果は複合体単独群および抗体と抗癌剤の併用群で観察され、両者はほぼ同等の抗腫瘍効果を示した。ついで、抗癌剤単独が抗腫瘍効果が高く、抗体単独では抗腫瘍効果は認められなかった。

Low キ メ ラ antibody の cropping と complex の synthesis: A7 キ メ ラ antibody を heritage 伝 subgroups み for え yeast culture か ら refined し た. Molecular weight 40000 の デ キ ス ト ラ ン と anti-cancer tonic (ネ オ カ ル チ ノ ス タ チ ン, マ イ ト マ イ シ ン C, ア ド リ ア マ イ シ ン) と の combination と を synthetic し, antibody bridging tonic を い て combining し complex を synthetic し た. Youdaoplaceholder0 <s:1> antibody activity および and anti-cancer activity がほぼ were maintained at 100% されて る る とを とを confirmation of た. と low antibody antigen molecules と の combining に の function with う cells - the の analytic: antibody と と も に cancer を cultivate す る こ と で, そ の raised colonization パ タ ー ン や な morphological variations change を beg し 検 た と こ ろ, antibody の add に よ り シ ャ ー レ に pay the し た cancer は stripping す る tendency を し, morphology に も not add group に compare し て globular に い near The form を indicates た. し か し, but 伝 レ ベ ル に お け る raised colonization factor に masato even し た heritage 伝 sub - the は prove で き な か っ た. Protein レベ レベ で で で った, then factor <s:1> occurs が antibody addition group でやや intensifies されたが, intentional <s:1> difference <e:1> recognition められな った. Low anticancer tonic と の to optimum combination わ せ の 検 beg: A7 と and す る こ と で, ネ オ カ ル チ ノ ス タ チ ン, マ イ ト マ イ シ ン C, ア ド リ ア マ イ シ ン, シ ス プ ラ チ ン な ど は い ず れ も resistance swollen sores unseen fruit は raised strong さ れ た が, 5 - FU の metabolic antagonism tonic で は そ の others な unseen fruit は recognize め ら れ な か っ た. Low ネ オ カ ル チ ノ ス タ チ ン と combining し た デ キ ス ト ラ ン と キ メ ラ antibody と の complex の unseen fruit の 検 beg: complex 単 alone, antibody 単 antibody と anti-cancer, anti-cancer tonic 単 alone, alone tonic の and の 4 つ の group に points け て resistance swollen sores unseen fruit を beg し 検 た. The target cancer cells are と, て, A7, which recognize the antigen, are present されて, る, る, and the gastric cancer cell culture line MKN45を is used with <s:1> た. High in most も い with swollen sores unseen fruit は complex 単 alone group お よ び と anti-cancer antibodies tonic の and group of で 観 examine さ れ, struck は ほ ぼ equal の resistance swollen sores unseen fruit を shown し た. つ い で, anti-cancer tonic 単 alone が swollen sores unseen high が く, antibody 単 alone で は resistance swollen sores unseen fruit は recognize め ら れ な か っ た.

项目成果

山口俊晴: "標準的D2郭清手術"外科. 63. 1169-1173 (2001)

Toshiharu Yamaguchi：“标准 D2 解剖手术” Surg. 63. 1169-1173 (2001)

山口俊晴: "モノクローナル抗体による癌治療"Drug Delivery System. 17. 29-34 (2002)

Toshiharu Yamaguchi：“使用单克隆抗体进行癌症治疗”药物输送系统。17. 29-34 (2002)。

Kokudo N: "Proliferative activity of intrahepatic colorectal metastases after preoperative hemihepatic portal vein embolization"Hepatology. 34. 267-272 (2001)

Kokudo N：“术前半肝门静脉栓塞术后肝内结直肠转移瘤的增殖活性”肝病学。

山口俊晴: "胃癌治療のガイドラインをめぐって-癌治療の新しい潮流-"日本医師会雑誌. 127. 67-72 (2002)

Toshiharu Yamaguchi：“胃癌治疗指南 - 癌症治疗的新趋势”日本医学会杂志 127. 67-72 (2002)。

山口俊晴: "胃癌のSentinel Node Navigation Surgery"外科. 63. 819-822 (2001)

Toshiharu Yamaguchi：“胃癌前哨淋巴结导航手术”Surg。 63. 819-822 (2001)