Xylosyltransferases: A new protein family of the heparan sulphate biosynthesis

木糖基转移酶：硫酸乙酰肝素生物合成的新蛋白质家族

• 批准号: 5315902
• 负责人: Privatdozent Dr. Thomas Brinkmann
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Laboratoriums- und Transfusionsmedizin
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5315902?language=en
• 关键词: Xylosyltransferases; new; protein; family; heparan

Uns gelang die erstmalige Isolierung der humanen UDP-D-Xylose: Proteoglykan-Coreprotein ß-D-Xylosyltransferase (EC 2.4.2.26; XT) aus dem Zellkulturüberstand einer JAR-Chorioncarcinomzellinie. Dieses initiale Enzym der Biosynthese von Glykosaminoglykanen besteht aus einer einzelnen Proteinkette von 120 kDa; die Primärstruktur wurde partiell durch Edman-Abbau ermittelt. Durch Screening der cDNA einer Chondrosarkomzellinie wurde die XT-DNA (XT-1, 4,5 kbp) sowie die DNA einer XT-Isoform (XT-II, 4,7 kbp) mit 80%iger Homologie zum isolierten Enzym gefunden. XT-I wurde bereits kloniert und in Vorversuchen als aktives Enzym in der Zellinie CHO-K1 exprimiert. Darüber hinaus wurden XT-I und XT-II der Ratte kloniert. Die Homologie zu den humanen Nukleotidsequenzen beträgt über 90%. Unsere Ergebnisse belegen, daß XT-I und XT-II Mitglieder einer neuen Familie von Glykosyltransferasen sind. Die humane XT, ihre Isoform(en) sowie die Ratten-XT sollen zur vollständigen Charakterisierung rekombinant hergestellt werden. Durch In vitro-Mutagenesen sollen Funktionsbereiche (z.B. UDP-Xylose-Bindungsstelle) identifiziert werden. Untersuchungen zur Genorganisation, Genexpression in unterschiedlichen Geweben sowie Identifizierung der XT-DNA anderer Spezies sollen folgen. Darüber hinaus sollen Antikörper zur Etablierung eines enzymimmunologischen Nachweisverfahrens hergestellt werden. Diese sollen auch der Lokalisierung der XT in Geweben und Zellkompartimenten dienen.

UDP-D-木糖：蛋白多糖-核心蛋白-D-木糖转移酶(EC 2.4.2.26；XT)Aus DEM Zellkultureüberstand einer JAR-Chorionancomzellinie。生物合成酶的首字母缩写是120 kDa的氨基糖苷酸酶。从XT异构体(XT-II，4，7KBP)的XT-DNA(XT-1，4，5KBP)和80%Iger Homologie zum isolierten Enzym(XT-1，4，7KBP)中筛选出XT-DNA。XT-I在Der Zellinie Cho-K1外基元中发现了一种新的同源异构酶。Darüber hinaus Wurden XT-I和XT-II der Ratte kLoniert。90%的人与人类同源。在此Ergebnisse Belegen，da？xt-I和xt-II的中和家庭von糖基转移的sind。人性化的XT，它的异形(EN)的Sowie die Ratten-XT Sollen zur vollständigen Charakterisierung rekombinant heregellt被删除。经体外培养-突变体Sollen Funktionsbereiche(Z.B.UDP木糖-Bindungsstelle)鉴定。Untersuhugen zur基因组织，基因在未分化地衣中的表达。Darüber hinaus Sollen antikörper zur Eablierung eines nachweisverfahrrens hersterellt.他说：“这是一件非常重要的事情。