光線力学治療(Photodynamic therapy)の網膜脈絡膜への影響

光动力疗法对视网膜和脉络膜的影响

• 批准号: 13771049
• 负责人: 中島 正巳
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771049/
• 关键词: 水溶性光感受性物質; ATX-S10Na; 脈絡膜新生血管; 病理組織学的検討; 光線力学療法; 光感受性物質; 病理組織

cynomolgus monkey(4-5Kg)の黄斑部周囲に波長647nmのクリプトンレーザーで強レーザー光凝固(100μm,0.1sec,800-900mW)を行い実験的脈絡膜新生血管を作製した。10〜15日後にフルオレセイン蛍光眼底造影を行って脈絡膜新生血管が発育したのを確認した。水溶性光感受性物質であるATX-S10Naを生理食塩水に溶解し静脈注射(6mg/Kg)した。ATX-S10Na投与後30-45分後に波長670nmのダイオードレーザーを出力25J/cm^2で実験的脈絡膜新生血管に2分間照射した。照射後1日目と7日目にフルオレセイン蛍光眼底造影、インドシアニングリーン蛍光眼底造影、光干渉断層計を行った。眼球摘出後20%ホルマリン・燐酸緩衝液固定・パラフィン包埋し、病理組織を観察した。照射後1日目の蛍光眼底造影では脈絡膜新生血管から蛍光色素の漏出は見られなかった。周囲の網膜血管、脈絡膜血管の閉塞は見られなかった。照射後7日目の眼底検査で脈絡膜新生血管は白色に線維化していた。フルオレセイン蛍光眼底造影では脈絡膜新生血管から蛍光色素の漏出は見られず、線維組織への組織染が見られた。インドシアニングリーン蛍光眼底造影では線維組織のブロックによる低蛍光が見られた。病理組織学的には脈絡膜新生血管は閉塞し、線維化していた。以上よりATX-S10Naは低エネルギーで脈絡膜新生血管を閉塞でき、周囲組織への障害が少ない光感受性物質であると考えた。現在、組織内のサイトカイン(VEGF,IL-8)、組織内の血管内皮細胞、網膜色素上皮細胞、マクロファージ、熱ショック蛋白を同定するため、それぞれvon Willebrand factor,CK18,HAM-56,HSP-70に対する抗体を用いて免疫染色を行う。また網脈絡膜のアポトーシスの状態をTUNNEL法を用いて検討している。

Cynomolgus monkey(4-5Kg) was used to control choroidal neovascularization at 647nm wavelength and at 100μ m, 0.1 sec, 800 -900mW. After 10 ~ 15 days, the development of choroidal neovascularization was confirmed by fundus photography. Water-soluble photosensitive substance ATX-S10Na is dissolved in physiological water and injected intravenously (6mg/Kg). Choroidal neovascularization was observed 30-45 minutes after ATX-S10Na was administered at a wavelength of 670nm and a force of 25J/cm^2. 1 to 7 days after irradiation, fundus photography, fundus photography and tomography were performed. After extraction, 20% phosphate buffer solution was used for fixation and pathological examination. One day after irradiation, the fundus photography showed choroidal neovascularization and pigment leakage. The blood vessels of retina and choroid are red and red. On the 7th day after irradiation, choroidal neovascularization was observed. In contrast, the choroidal neovascularization, the leakage of pigment, and the staining of linear tissues were observed on fundus photography. The color of the fundus can be seen in the low intensity of the fundus. Pathological histology of choroidal neovascularization is the most important aspect of choroidal neovascularization. ATX-S10Na is a kind of photoreceptor substance that can inhibit choroidal neovascularization. Immunostaining was performed with antibodies against VEGF,IL-8, vascular endothelial cells, retinal pigment epithelial cells, VEGF, and HSP-70 in tissues. The status of choroid tissue was investigated by TUNNEL method.