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一過性虚血による皮弁萎縮のメカニズムの解明-脂肪細胞・血管内皮細胞における虚血脆弱性とアポトーシスの発現-

阐明短暂性缺血引起皮瓣萎缩的机制 - 脂肪细胞和血管内皮细胞缺血脆弱性和凋亡的表达 -

基本信息

批准号：
13771062
负责人：
今井啓道
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

【方法】Wister系ラット50匹を用いた。Epigastric vesselsを茎とした下腹部皮弁(2.5x4.5cm)を挙上した後、マイクロクリップにてEpigastric vesselsを8時間血行を遮断した8時間虚血群と、皮弁挙上のみのSham群をそれぞれ25匹作成した。再還流後8時間、24時間、48時間、4日目、7日に各群5匹ずつ皮弁を採取し、組織学的評価および、1視野あたりの真皮下脂肪細胞と表皮細胞の細胞数をカウントした。さらにCytochrome CとCaspase-3について免疫染色法を行い、発現の局在と経時的変化を追跡した。また、Caspase-3についてWestern blottingを行ない、皮弁全体での経時的発現量を検討した。【結果】脂肪細胞数の有意差のある減少が8時間虚血群の7日目にのみ認められた。抗Cytochrome c抗体を用いた免疫組織染色像では、8時間虚血群の再還流後8時間目にのみ脂肪細胞に強い発現が見られた。24時間以降では発現は認めなかった。一方、抗Caspase-3抗体を用いたWestern blottingでは、対照群には一定した発現を認めるが、8時間遮断群では再還流後8時間・24時間で強い発現が見られ、以降発現は減弱していた。さらに抗Caspase-3抗体を用いた免疫組織染色で、再還流後8時間目のCaspase-3の発現部位を確認すると、脂肪細胞に強い発現が見られた。以上の結果をまとめると、表皮細胞ではCytochrome cもCaspase-3も発現せず、細胞死も生じなかったが、脂肪細胞はCytochrome cとそれに引き続くCaspase-3の発現をみとめ、7日目に細胞死を生じていた。脂肪細胞の7日目の細胞死にはCaspase-3系apoptotic cascadeが関与している可能性が示'唆された。以上は、第19回日本形成外科学会基礎学術集会(仙台市)にて発表した。

[Method] Wister system is 50 pieces of paper. Epigastric vessels (2.5x4.5cm) are made up of 25 pieces of skin. At 8, 24, 48, 4, and 7 days after re-injection, 5 skin samples were taken from each group, histologically evaluated, and 1 field of vision was used to determine the cell count of subcutaneous fat cells and epidermal cells. Cytochrome C and Caspase-3 were detected by immunostaining and the changes were traced at the time of detection. In addition, Caspase-3 is used in Western blotting, and the amount of discovery over time in the entire skin is discussed. [Results] The number of fat cells was significantly decreased in 8 days and the number of empty blood group was significantly decreased in 7 days. Anti-Cytochrome C antibody was used in the immunostaining image, 8 hours after the blood circulation, 8 hours after the fat cells were strongly detected. 24 Time to fall One side, anti-Caspase-3 antibody in the middle of Western blotting, anti-Caspase-3 antibody in the Immunohistochemical staining with anti-Caspase-3 antibody was performed, and the site of Caspase-3 expression was confirmed 8 hours after reperfusion. The above results show that Cytochrome c and Caspase-3 are detected in epidermal cells, and in adipocytes, Cytochrome c and Caspase-3 are detected in adipocytes. Caspase-3 is associated with adipotic cascade in adipocyte death at 7 days old. The 19th Basic Academic Conference of the Japanese Academy of Formative Surgery (Sendai City) was held.