同種皮膚移植における免疫寛容の分子生物学的機構解析

同种异体皮片免疫耐受的分子生物学机制分析

• 批准号: 13771064
• 负责人: 秋田 定伯
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771064/
• 关键词: 骨髄間葉系幹細胞; 塩基性繊維芽細胞増殖因子; 骨形成因子; 細胞周期; 異クロマチン; 白血病抑制因子(LIF); 免疫寛容(immune tolerance); 胎児性線維芽細胞(BALB-3T3); STAT3; MAPキナーゼ

難治性潰瘍の治療や、放射線照射後の創傷治癒促進には、その部位以外からの資源(resource)が必要であり、通常組織移植・皮弁移植などが考慮される。広範囲かつ重篤な皮膚創傷治癒再生には、現行の同種移植は有効であり、スキン・バンクなどで一定の成果を認めているものの、新鮮同種組織移植における生物活性(viability)の高い生体材料は入手困難などにより、各々の臨床症例には必ずしもタイムリーに供給されていない。そこで、将来の同種細胞移植(骨髄間葉系幹細胞)を用いた細胞特性の検討と、動物移植後の効果を免疫不全ラット、免疫抑制剤投与下のカニクイサルを用いて検討した。ヒト骨髄間葉系幹細胞(hMSC)は24時間無血清下、塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)単独、もしくは骨形成因子(BMP-2)との併用刺激により、時間依存的な細胞増殖を示し、BMP-2刺激により、細胞周期の進行を認めた。細胞増殖発現タンパクである、ウェスタン・プロット法によるPCNA、PTTG発現も有意に上昇し細胞増殖をタンパクレヴェルで確認した。更に、電子顕微鏡像では、核の異クロマチン化と粗面小胞体発現を認め、BMP-2による細胞の分化が促進された。以上、in vitroの結果から、hMSCは増殖因子・サイトカインにより初期細胞増殖性を来たし、細胞分化誘導性を持つことを確認した。更に、ヌードラット(F344/NjCL-rnu)背側に肉様膜を含む、1.5×1.5cm^2の欠損創にブタ由来コレーゲンスポンジ二重膜(ペルナック【○!R】)にhMSC及びbFGF添加により、術後7日目に真皮のみなら表皮の治癒を認め、6週間の観察にて表皮にhMSC由来タンパク発現を認めた。これら事実から骨髄間葉系幹細胞は創傷治癒に有効である事が示された。

Refractory ulcer の や, radiation treatment after の wound healing promoting に は, そ の parts か ら の resources (resource) が necessary で あ り, usually tissue transplants chemical skin grafting な ど が consider さ れ る. Hiroo van 囲 か つ heavy Benedict な skin wound healing regeneration に は, current の homograft は have sharper で あ り, ス キ ン · バ ン ク な ど で の results を recognize め て い る も の の, fresh the same tissue transplants に お け る high biological activity (viability) の い raw material は sandbody difficult な ど に よ り, various 々 の clinical cases に は will ず し も タ イ ム リ Youdaoplaceholder0 に supplies されて な な に. そ こ で, future の the same cell transplant (bone marrow mesenchymal stem cells) を with い た cell features の beg と 検, animals after transplantation の unseen fruit を immune insufficiency ラ ッ ト, immunosuppression tonic cast with the の カ ニ ク イ サ ル を with い て beg し 検 た. Department of ヒ ト bone marrow mesenchymal stem cells (hMSC) は 24 time, salt base line under serum-free dimension bud cells raised colonization factor (bFGF) 単 alone, も し く は bone formation factor (BMP - 2) と の and stimulate に よ り, time dependent な cells raised colonization を し, BMP - 2 stimulus に よ り, cell cycle の を recognize め た. Cells raised colonization 発 now タ ン パ ク で あ る, ウ ェ ス タ ン · プ ロ ッ ト method に よ る PCNA, PTTG 発 now rising も intentionally に し cells raised colonization を タ ン パ ク レ ヴ ェ ル で confirm し た. More に, electronic 顕 micro mirror で は, nuclear の different ク ロ マ チ ン change と coarse surface vesicular body 発 を now recognize め, BMP - 2 に よ る cells の が promote さ れ た. Results above, the in vitro の か ら, hMSC は raised yield factor, サ イ ト カ イ ン に よ り primary cell raised colonization を た し, cell differentiation induced を hold つ こ と を confirm し た. More に, ヌ ー ド ラ ッ ト F344 / NjCL - rnu dorsal に meat contains others in membrane を む, 1.5 x 1.5 cm ^ 2 の owe gen に ブ タ origin コ レ ー ゲ ン ス ポ ン ジ double membrane (ペ ル ナ ッ ク [author! R) に hMSC and び bFGF add に よ り, 7 orders, postoperative に leather の み な ら epidermis の cure を confess め, 6 weeks between の 観 examine に て epidermis に hMSC origin タ ン パ ク 発 を now recognize め た. <s:1> れら practice ら ら bone marrow mesenchymal stem cells <s:1> wound healing に is effective である work が shows された.

项目成果

Akita S, Fukui M, Fujii T, Akino K: "Interaction between mesenchymal stem cells and osteogenic cytokines in vitro and in vivo"ETRS Proceedings of the Status of New Technology in Tissue Repair. (in press).

Akita S、Fukui M、Fujii T、Akino K：“体外和体内间充质干细胞与成骨细胞因子之间的相互作用”ETRS 组织修复新技术现状论文集。

Akita S, Fujii T: "Interaction between mesenchymal stem cells and osteogenic cytokines in vitro and inn vivo"Tissue Engineering using Stem Cell (Yonsei University, Seoul, Korea). 21-23 (2002)

Akita S、Fujii T：“体外和体内间充质干细胞与成骨细胞因子之间的相互作用”使用干细胞进行组织工程（延世大学，首尔，韩国）。

堤 英博, 平野明喜, 秋田定伯, 藤井徹, 他: "Pyknodysostosisに対する上顎延長の経験"日本頭蓋学顔面外科学会誌. 17巻3号. 64-70 (2001)

Hidehiro Tsutsumi、Akiyoshi Hirano、Sadahaku Akita、Toru Fujii 等：“上颌骨延长术治疗固缩性骨性早闭的经验”，日本颅面外科杂志，第 17 卷，第 3. 64-70 期（2001 年）。

Akita S, Nakagawa H, Akino K, Fukui M, Fujii T: "Stem Cells in Cutaneous Wound Healing"Journal des Plaies et Cicatrisations. (In Press).

Akita S、Nakakawa H、Akino K、Fukui M、Fujii T：“皮肤伤口愈合中的干细胞”Journal des Plaies et Cicatrisations。

Akita S, Ishihara H, Daian T, Dazai S, Fujii T., et al.: "Cytokine-dependent gp130 receptor subunit regulates rat modified axial-pattern epigastric flap"J Invest Surg. (in press).

Akita S、Ishihara H、Daian T、Dazai S、Fujii T. 等人：“细胞因子依赖性 gp130 受体亚基调节大鼠改良轴向型上腹皮瓣”J Invest Surg。