細胞増殖分化とC/EBPs発現に対する細胞接着シグナルの細胞内作用分子機構の解明

阐明细胞粘附信号对细胞增殖分化及C/EBPs表达的细胞内分子机制

• 批准号: 13771095
• 负责人: 岩佐 佳子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771095/
• 关键词: C; EBP beta; MAP kinase; gap junction; 分化; gapjunction

分化について、各々の分化形質に関係する転写因子については、研究が進んでいるが、分化が決定される初期の研究はあまり進展していない。本研究では分化初期段階に着目し、細胞間や細胞外からの情報の伝達と、分化初期に発現する転写因子であるC/EBP betaの関係について研究を行ってきた。total C/EBP bata蛋白質と塩濃度を変化させて抽出されたC/EBP beta蛋白質をwestern blotting法によって検出した。C/EBP betaは分化誘導直後は核内にびまん性に、終末分化につれて核にpunctate putternで存在するといわれ、C/EBP betaの細胞内局在をimmunohistchemistryで検討した。このpuctate putternは、分化誘導12時間をピークに減少するが、western blotting法によると分化誘導時、細胞内には存在していることがわかった。細胞内で抗体によって検出できないような状態になっているのではないかと考え、検討中である。次に、細胞外からのシグナルの情報伝達にはkinaseが関与することに着目して実験を行った。Erk inhibitor PD98059を分化誘導時に加えると分化促進作用、前処理して分化誘導時添加すると分化抑制作用、MAP kinase p38 inhibitor SB203580を分化誘導時添加すると分化抑制作用、calmodulin kinase 2 inhibitor KN-93分化誘導時添加では、分化抑制させる。これらのkinase inhibitor添加で、C/EBP betaの塩濃度による抽出度に相違があった。これは、C/EBP betaのリン酸化状態を変化させることで構造及び他の蛋白質との結合が変化し、影響がでるのではないかと考えている。最後に、細胞細胞間接着シグナルの分化への影響については、gap junction蛋白質であるconnexin43とそのdominant-negative体を細胞内に導入するとどちらも分化抑制した。その影響を検討中である。

The differentiation strategy, the differentiation pattern, the writing factor, the progress of the study, the determination of the initial stage of the study, the progress of the study, the progress of the study. In this study, we focused on the target in the early stage of differentiation, reached the level of extracellular enzyme in the early stage of differentiation, and detected the factors of gene expression in the early stage of differentiation. The study was conducted in the study of C/EBP beta gene expression. Total C/EBP bata protein was extracted from C/EBP beta protein by western blotting method. After the direct differentiation of C/EBP beta, there were abnormal sex in the nucleus, terminal differentiation, punctate puttern in the nucleus, and immunohistchemistry in the cells of C/EBP beta. During the 12-hour period of puctate puttern and differentiation, when the number of cycles was reduced, and when the western blotting method was used to detect differentiation, there was a significant increase in the number of cells in cells. The intracellular antibody was detected in the cell, and the antibody was detected in the cell. For the second time, the extracellular drug was used to treat the disease. The situation was similar to that of the kinase and the doctor. During the differentiation of Erk inhibitor PD98059, the promotion of differentiation, the inhibition of differentiation, the inhibition of differentiation of MAP kinase p38 inhibitor SB203580, the promotion of differentiation of calmodulin kinase 2 inhibitor KN-93 and the inhibition of differentiation were added. The kinase inhibitor is added, the C/EBP beta is different, the pull-out is the same. The process of acidification, C/EBP beta treatment, chemical acidification, chemical acidification, acidification, acidification, In the end, the cell cycle was followed by cell differentiation, gap junction protein, connexin43, dominant-negative, and intracellular differentiation inhibition assay. I don't know if I'm in the middle of something.