顎骨嚢胞壁線維芽細胞由来の液性因子による歯根嚢胞の成因増大の解析

颌骨骨囊肿壁成纤维细胞体液因素导致牙根囊肿增加的病因分析

• 批准号: 13771203
• 负责人: 楠美 昭則
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771203/
• 关键词: 歯根嚢胞; 定量RT-PCR; IL-6; KGF; EGF; MAP kinase

本年度は、歯根嚢胞とIL-6や上皮細胞増殖因子(EGF)、角化細胞増殖因子(KGF)等との相互反応性について解析を行った。解析として、歯根嚢胞の内面層は口腔粘膜上皮細胞に似ているため、口腔粘膜上皮細胞を用いて、IL-6やEGFやKGFの刺激の効果について解析した。(1)口腔粘膜上皮細胞のそれぞれの因子による増殖効果を解析正常粘膜表皮から分離した口腔粘膜上皮細胞を角化細胞無血清培地で96穴プレートに1000細胞/wellで培養し、IL-6(5ng/ml)、EGF(5ng/ml)、KGF(5ng/ml)加え、細胞増殖能について72時間後MTT法を用いて解析したが、粘膜上皮細胞の増殖能促進はなかった。LPS(2ng/ml)やIL-1β(5ng/ml)でも同様の結果が得られた。(2)口腔粘膜上皮細胞のそれぞれ抗体による細胞増殖の抑制効果を解析EGFやKGFは粘膜上皮細胞から無刺激状態で産生されているため、抗EGF抗体(100ng/ml)、抗KGF抗体(100ng/ml)を加え培養したが、細胞増殖能に対して有意な抑制効果は得られなかった。(3)歯肉由来線維芽細胞に対する細胞伸展刺激メカニカルストレスの効果細胞の伸展刺激により、一酸化窒素(NO)の産生が認められ、細胞伸展装置(スカラテック社、当講座所有)を用い、伸展率7%、0.25Hzの伸展刺激が最もNOを産生させることがわかった。この条件で合成酵素はiNOSであることがRT-PCR法で明らかにされた。2年で、培養した歯根嚢胞由来線維芽細胞についてIL-6の産生が、有意に高いことが証明された。がIL-6は口腔上皮粘膜細胞の直接の増殖能を促進せず、また、他の因子も口腔粘膜上皮細胞の増殖に直接関与していなかった。現在伸展刺激を用いて線維芽細胞の解析から嚢胞周囲の骨吸収、骨硬化についてNOの産生と骨改造の関与が証明されメカニカルストレスとの関与について解析する。

This year, the analysis of the interaction between tooth root cells, IL-6, epidermal growth factor (EGF) and keratinocyte growth factor (KGF) was carried out. Analysis of the effects of IL-6, EGF and KGF stimulation on oral mucosa epithelial cells in the inner layer of dental root cells (1)Oral mucosal epithelial cells were cultured in serum-free medium at 96 ℃ and 1000 cells/well. IL-6(5ng/ml), EGF(5ng/ml), KGF(5 ng/ml) and cell proliferation were detected by MTT assay after 72 hours. LPS(2 ng/ml) and IL-1β(5ng/ml) were the same. (2)Anti-EGF antibody (100ng/ml) and anti-KGF antibody (100ng/ml) were added to the culture of oral mucosal epithelial cells. Anti-EGF antibody (100 ng/ml) and anti-KGF antibody (100ng/ml) were added to the culture of oral mucosal epithelial cells. (3)Cell stretch stimulation, NO production, cell stretch equipment, stretch rate 7%, 0.25Hz stretch stimulation, cell stretch stimulation, cell stretch equipment, cell stretch equipment, cell stretch The condition of iNOS synthesis was determined by RT-PCR. 2 years later, the culture of the cultured cells from the root of the line to the production of IL-6, intentionally high levels of IL-6 have been demonstrated. IL-6 is directly related to the proliferation of oral epithelial cells by promoting the growth of oral epithelial cells. The relationship between NO production and bone remodeling is demonstrated by the analysis of cell growth, bone resorption and bone sclerosis.