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老齢個体での骨再生への幹細胞他種移植とGFPマウスを用いた組織由来の検討

将其他物种的干细胞移植到老年人的骨再生中并使用 GFP 小鼠研究组织起源

基本信息

批准号：
13771215
负责人：
植野高章
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

老齢な個体は自身の固有細胞が骨形成能の低下を起こしており自家移植した際に十分な骨形成が期待できない。この問題を解決するために若い個体から採取した骨膜中に存在する組織幹細胞を移植し、老齢個体での骨形成能を組織学的、X線学的に観察した。その結果、移植後28日目には軟X線写真で石灰化が観察され、組織学的には形成軟骨が骨に置換される軟骨内骨化を観察した。移植後35日目には軟X線写真で石灰化の発達を観察し、組織学的に軟骨は消失しほぼ骨に置換した。この骨周囲の骨形成細胞は活発なBMP陽性反応をしめし、この免疫反応は免疫抑制剤中止後も骨形成過程の中で活発に観察された。こうした結果から老齢個体で形成された骨は移植された他種移植骨膜から形成された軟骨によって誘導されたレシピエントの細胞が骨芽細胞に分化し骨形成を行ったと考えられる。幹細胞移植による骨形成では他種移植を用いた場合には、最終的に形成される骨はレシピエントに由来することが示唆された。最終的な形成骨がレシピエント由来であることは免疫拒絶反応抑制のために使用する免疫抑制剤の使用期間を移植後の初期のみにすることが可能となり骨膜幹細胞移植の適応や可能性を拡大するものである。また今回GFPマウスの骨膜細胞移植をラットに試みたが、GFPマウスの骨軟骨形成細胞が増殖、分化の過程でGFP抗体の発現が維持されるのか、また組織の脱灰過程で不活性になるのか不明であるが凍結切片などの手法で今後は解明する予定である。

The bone formation ability of the old man's own cells is low, and the bone formation is expected at the time of self-transplantation. This problem can be solved by tissue stem cell transplantation, histological and X-ray examination of bone formation in elderly individuals. Results: 28 days after transplantation, calcification was observed by soft X-ray photography, and endochondral ossification was observed by histological examination. 35 days after transplantation, soft X-ray photographs showed calcification, histological findings showed cartilage disappearance and bone replacement. These periosteal bone-forming cells are active in BMP positive responses, immune responses are active in bone-forming processes after immunosuppressive agents are discontinued, and the activity of bone-forming cells is observed. The result is that the cells of the bone bud are differentiated into bone cells. Stem cell transplantation, bone formation, and other types of transplantation in the case, the final formation of bone formation, and the origin of this study The origin of the final formation of periosteal stem cells, the use of immunosuppressive agents, the initial period of use after transplantation, and the possibility of appropriate transplantation of periosteal stem cells In this paper, we try to find out how to transplant GFP cells into periosteum, how to develop GFP antibodies during the process of proliferation and differentiation of GFP cells into osteochondrogenic cells, how to maintain GFP antibodies, how to inactivate GFP antibodies during the process of deashing tissues, and how to freeze sections.