ヒト線維芽細胞におけるcollagenase(MMP-1)遺伝子の発現

胶原酶（MMP-1）基因在人成纤维细胞中的表达

• 批准号: 13771289
• 负责人: 上松 節子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Matsumoto Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771289/
• 关键词: 歯根膜線維芽細胞; メカニカルストレス; C-EBP; MMP-1; collagen type-I; RT-PCR; C; EBP-β; IL-1β; 線維芽細胞

本研究は,サイトカイン(TNF-α、IL-6)およびメカニカルストレス刺激下のヒト線維芽細胞におけるC/EBPの発現とその変化を明らかにし,それがMMP-1遺伝子の発現にどのような影響を与えているかを解明することを目的として行った.Shimizuらの方法^<11)>に準じて,ヒト歯根膜線維芽細胞を得た.5〜7代目のコンフルエントな状態になった培養細胞をPBSおよびトリプシンで処理しその細胞浮遊液を収集し,6 hall plate(Flexercell strain unit)に播種し実験に用いた.メカニカルストレスとして伸展刺激を加えた.矯正的歯の移動における組織学的変化を考慮した場合,培養プレート底部を持ち上げる方向のメカニカルストレスを加えるほうが,より矯正的歯の移動様式,特に牽引側での組織変化に近い条件であると考えられた.そこで,予備実験よりプレートの底部からの力に耐えうる最大限の力で,かつ矯正臨床での犬歯,小臼歯部における矯正力と同等の力として荷重を120gと設定した.対照群としては6 hall Plate上に非荷重のものを設定し,荷重開始2時間後に細胞を回収した.実験群は2時間および24時間荷重し,それぞれ細胞を回収した.得られた細胞より通法に従いtotal RNA精製,first-strand cDNAの合成を行いRT-PCR法にて,歯周組織の炎症反応および骨吸収においてに重要なメディエーターであるIL-1βと,MMP-1,collagen type-ImRNAの検出を行った.その結果,本実験のメカニカルストレス下において,MMP-1およびcollagen type-ImRNAの発現に著明な経時的変化は認められなかった.またIL-1βmRNAの発現は認められなかった.本実験では,矯正臨床における歯の移動に近いと考えられたメカニカルストレスの条件設定であったが,骨のリモデリングに関与すると考えられているサイトカイン(IL-1β,TNF-α,IL-6など)の発現およびそれらのMMP-1遺伝子の発現に及ぼす作用について比較検討するには,メカニカルストレス条件についてさらなる検討が必要であると考えられた.現在,メカニカルストレスの強さおよび種類にさらに改良を加えて,実験を継続して行っている.

In this study, we use TNF- α, IL-6) to maintain germ cells in response to C/EBP stimulation. In this study, we use the MMP-1 subset to show that there is a significant difference between the two methods.) & gt) As a result of the high standard, the root membrane lines have been successfully maintained. 5 and 7 generations have been developed. The cells have been cultured in the form of PBS cells. The cell floatation liquid has been collected and 6 hall plate (Flexercell strain unit) has been sown for use. I don't know what to do with stretching stimulation. This is a good way to improve the chemistry of computer science, and at the bottom of the system, you need to make sure that you are in the right direction, and that you are in the right direction. Make sure that the equipment is loaded at the bottom of the machine, and that the load is 120g under the same force, and the load is 120g. According to the setting of the non-load cycle on the 6 hall Plate, the load will be returned after the load starts at 2. When the load is off 24 hours in the cluster 2, the cell will return the load in 24 hours. Cell culture was used to detect total RNA, RT-PCR was used to synthesize first-strand cDNA, tissue was used to detect inflammation, bone resorption, bone resorption, IL-1 β, and MMP-1,collagen type-ImRNA. The results show that we need to make sure that you are busy, and that the MMP-1 collagen type-ImRNA will show you the information you need when you are aware of the situation. I need IL-1 β mRNA to show that I am suffering from a bad situation. In this system, we are in the process of moving the health care system in the near future. We need to set the conditions for health care. This is the best way to compare the performance of IL-1 β, TNF- α, IL-6 (MMP1). I don't know if it's necessary to take a test. At present, it is necessary to strengthen the improvement and improvement of the general information system.

项目成果

大嶋嘉久: "ヒト歯根膜線維芽細胞におけるメカニカルストレスによるIL-1β,MMP-1(collagenase), collagen type-IのmRNAの発現について"松本歯学. 28・1. 7-12 (2002)

大岛义久：“关于人牙周膜成纤维细胞中机械应力引起的IL-1β、MMP-1（胶原酶）和I型胶原mRNA的表达”松本牙科28・1（2002）。