骨髄細胞移植による心血管再生医療の確立-内膜障害血管に対する内皮再生医療-

通过骨髓细胞移植建立心血管再生医学 - 针对内皮损伤血管的内皮再生医学 -

• 批准号: 02J03816
• 负责人: 藤山 総一郎
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J03816/
• 关键词: 再生医療; 内皮再生医療; 骨髄細胞移植; 最狭窄; 冠動脈形成術

目的 虚血下肢に対する骨髄単核球細胞(BM-MNC)移植では、未成熟な内皮系の細胞(ECC)と血管新生因子の供給により血管新生を認める。MCP-1は、内皮剥離部位で発現増加し、MNCの内皮への接着のtriggerとなる。我々は、MCP-1によって活性化されたBM-MNCがバルーン傷害血管内皮に接着し、内膜肥厚を抑制するかどうか検討した。方法 骨髄細胞1よラット(WKAH/Hkm)大腿骨と剄骨より採取した。左総頚動脈にバルーン障害を加え、障害後7日目にBM-MNC(10^7cell/1ml)、冠動脈内皮細胞(CMEC)(10^7cell/1ml)、生理食塩水(1ml)を大腿静脈より投与した。(各々n=10)バルーン障害後4日目にBM-MNCの内皮への接着のtriggerとして、MCP-1 cDNA-plasmidを下肢に筋肉内注射した(150μg/site 2個所)。障害後21日目に総頚動脈を摘出し検討した。結果 MCP-1の前処置なしにBM-MNCを投与した群は骨髄細胞の障害内皮への接着は極小数であり、内皮再生は認めず内膜肥厚に影響しなかった。Western Blotによる検討では、血中のMCP-1濃度は投与後3日目にpeakを認め(2.6倍)その後低下した。MCP-1を前処置した群はBM-MNCが高頻度に障害内皮へと分化し、内膜肥厚を著明に抑制していた。(内膜中膜比86+/-5%減少)又、血管の拡大や中膜のBrdU陽性細胞も減少した。内皮へのBM-MNCを免疫染色にて検討したところCD45とMac-1陰性であったが、8因子抗体、VEGF、bFGF抗体では陽性であった。細胞のcharacterは内皮系ではあるがlymphocyteやmacrophargeではない事がわかった。内皮の再生はEvans blueに染色されないことで確認した。

Objective to supply neovascularization factor (Angiogenesis Factor) to the transplanted bone nuclear globular cell (BM-MNC) and the immature endothelial cell (ECC) of the hypovolemic lower limb. MCP-1, endothelial exfoliation, MNC, and then trigger. I, MCP-1, activate, BM-MNC, damage vascular endothelium, then intimal hypertrophy, inhibit intimal hypertrophy. Methods 1 bone marrow cell (WKAH/Hkm), thigh bone and bone bone were harvested. BM-MNC (10 ^ 7 cell