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光親和性ラベル化後修飾法を用いた糖質センサーの開発

利用光亲和标记后修饰方法开发碳水化合物传感器

基本信息

批准号：
02J09239
负责人：
笠置典之
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

3次元的に折り畳まれた状態でのタンパク質は、複数のアミノ酸が反応性の官能基として表面に存在している。そのため、タンパク質表面の特定のアミノ酸残基を位置および官能基選択的に区別し、かつ、タンパク質同士の表面接触に打ち勝って特定のタンパク質表面を化学変換することは困難である。さらに、タンパク質が機能を発現する場は、従来の有機化学が苦手とする水中であるため、既存の有機化学的アプローチが通用しない場合も多い。よって、タンパク質を有機化学の対象として化学変換するには、タンパク質に適した新たな戦略が必要とされる。このような観点から、筆者は、ペプチド、タンパク質表面を標的とした新しい有機化学的な手法の開発を目指した検討を行った。カーボニックアンヒドラーゼ(hCA II)の阻害剤の分子認識とタンパク質表面での新しい有機化学反応を利用し、ワンポット連続反応によってhCA II表面に蛍光色素を高収率で導入できることを示した。タンパク質表面とのラベル化反応には、エポキシ基とイミダゾール環との特異的な求核反応を利用し、蛍光色素修飾反応には、ヒドラゾン/オキシム交換反応を用いた。これらの連続反応により、hCA II本来の機能を保持したまま、蛍光性バイオセンサーへと変換することに成功した。本手法は、システインを有するタンパク質にも適用可能であることが実証された。これによって、これまでに報告されてきた光アフィニティーラベル化後修飾法(P-PALM法)を拡張した新たな戦略を提案することに成功した。

3-D functional groups exist in the state of organic matter, organic matter and organic matter. It is difficult to distinguish between the position of the specific acid residue on the surface and the selection of the functional group. In addition, the functions of natural materials can be realized in water where recent organic chemistry is difficult to handle, and existing applications of organic chemistry can be used in many situations. A new approach to organic chemistry is needed. The author of this paper discusses the development of new methods of organic chemistry. The molecular understanding of the protective agent of hCA II and the application of new organic chemical reactions on the surface of hCA II are shown in this paper. The surface of the pigment is modified by the pigment, and the surface of the pigment is modified by the pigment. The original function of hCA II was maintained and the optical property was changed successfully. This method is suitable for all kinds of applications. The PALM method is a new method for analyzing and analyzing the results.