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シナプス形成におけるカドヘリン分子の機能解析

钙粘蛋白分子在突触形成中的功能分析

基本信息

批准号：
02J10988
负责人：
梅田達也
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J10988/
关键词：
海馬シナプス GFP 組織培養

项目摘要

興奮性シナプスは軸索のvaricosityと樹状突起のspineとの間の細胞間接着構造であり、その形成・維持過程には接着分子が重要な役割を果たしている。代表的な接着分子であるカドヘリン分子はシナプスに局在し、シナプス形成に必要である事が知られている。一方、シナプス構造の維持におけるカドヘリン分子の働きについては知見が少なく、本研究では維持過程におけるカドヘリン分子の機能解析をすすめている。シナプスは接着構造を形成している一方で、spineは分単位の非常に速い形態変化をしている事が知られる。そこで、シナプスの接着構造がどのように保持されているかを確かめるため、海馬スライス培養中の互いに接触している軸索のvaricosityと樹状突起のspineの形態変化を同時に観察した。まず、それぞれの構造を区別して観察するために、CA3領域錐体細胞のvaricosityをローダミンデキストランでラベルし、更にCA1領域錐体細胞のspineをGFPでラベルした。ラベルされたvaricosityとspineの形態は2光子励起蛍光顕微鏡を用いて同時に検出することができた。次に相互に接触している2つの構造の経時観察を行ったところ、varicosityとspineは互いに速い形態変化を起こしながらも接着を保っていた。さらに、強い電気刺激を与えることで樹状突起の形態を大きく変化させたときでも、大部分のvaricosityは樹状突起との接触を維持したままであった。これらの結果からシナプスを形成しているvaricosityとspineは接着構造を維持しつつ形態変化を起こす事が明らかになった。現在、N-cadherinの接着を阻害するように設計されたペプチドを海馬スライス培養に作用させたときにシナプス構造の経時観察を同様に行い、シナプスの接着構造に変化が起きるか解析している。

Excitability, axonal varisivity, dendritic protrusions, spine, and cell-to-cell structure, formation and maintenance process, and molecular structure are important. The representative is the であるカドヘリンmolecule はシナプスにbureau in し, シナプス formed にNecessary である事が知られている. On one side, the シナプス structure maintains the におけるカドヘリンmolecule の働きについては知见が小This research is based on the functional analysis of the maintenance process of the molecule.シナプスはThen the structureをformsしている一lateralで,spineはdividedunitのveryにspeedいmorphosischangeをしている事が知られる.そこで, シナプスのcontinued structure がどのようにKEEP されているかを真かめるため, 凯马スライス修中の mutualいにContact しているaxonal のvaricosity と dendritic process のspine のmorphological change をsimultaneously に観Observation した.まず、それぞれのstructureをdifferentiationして観看するために、CA3 domain pyramidal cell のvaricosityをローダミンデキストランでラベルし, and more CA1 area pyramidal cells のspine を GFPでラベルした.ラベルされたvaricosityとspineのmorphologyは2 photons excite the light of the micromirror and use it at the same time to produce the することができた.に mutual contact している 2 つの structure の経时看を行ったところ、varicos ityとspineは mutual いにspeed いmorphosis change を出こしながらもContinue を宝っていた.さらに, strong electric stimulation を and えることでdendritic protrusion のmorphology を大きく変化させたときでも、Most of the varicosity and dendritic protrusions are maintained in contact with each other.これらの Result からシナプスを Formation しているvaricosity とspineは Then structure を Maintain しつつ morphology change をrise こす事が明らかになった. Now, the role of N-cadherin is to hinder the design and cultivation of seahorses.せたときにシナプスconstruct the の経时榳看を同様に行い, シナプスの and then construct the に変化が开きるかanalytic している.