カイコ細胞におけるウイルス特異的認識タンパク質の同定

カイコに感染するウイルスの中で唯一非感受性品種が確立されている濃核病ウイルス(DNV)のキャプシドタンパク質に反応する宿主因子の検索を目的とした。DNVには2種類が知られており、DNV-1とDNV-2と分類されている。これらウイルスはカイコの中腸円筒細胞のみで増殖し、他の細胞や非感受性品種では全く感染増殖しないとされている。両方のキャプシドタンパク質をコードしている領域をクローニングして、GST融合タンパク質を作成した。これを元に中腸タンパク質に対するウエストウエスタンを行った結果、感受性品種と非感受性品種で違いが見られた。また感受性品種に感染させてもほとんど発病しない5齢では非感受性品種と同じ様なシグナルが得られた。またDNVの研究が進んでいない一つの原因に、感染可能な培養細胞系が確立されていない事が上げられるが、カイコ中腸で非感受性特異的に見られたシグナルが培養細胞にも見られるかどうかを数種類のカイコ培養細胞タンパク質を用いて調べた。その結果、非感受性と同様のシグナルを示す細胞系と、感受性品種に近いシグナルを示す細胞系とが見つかった。これら培養細胞にそれぞれのDNVを段階希釈して感染させ、感染後のウイルスDNAをPCRによって検出した結果、良く感染し、増殖するものとそうでないものがあることが解った。これらの事より、ウイルス構造タンパク質に親和性のある宿主タンパク質は存在するが、それは感染を促進すると言うよりもむしろ、感染を防御するような働きのあるタンパク質があるのではないかと考えられた。

カイコに感染するウイルスの中で唯一非感受性品種が確立されている濃核病ウイルス(DNV)のキャプシドタンパク質に反応する宿主因子の検索を目的とした。DNVには2種類が知られており、DNV-1とDNV-2と分類されている。これらウイルスはカイコの中腸円筒細胞のみで増殖し、他の細胞や非感受性品種では全く感染増殖しないとされている。両方のキャプシドタンパク質をコードしている領域をクローニングして、GST融合タンパク質を作成した。これを元に中腸タンパク質に対するウエストウエスタンを行った結果、感受性品種と非感受性品種で違いが見られた。また感受性品種に感染させてもほとんど発病しない5齢では非感受性品種と同じ様なシグナルが得られた。またDNVの研究が進んでいない一つの原因に、感染可能な培養細胞系が確立されていない事が上げられるが、カイコ中腸で非感受性特異的に見られたシグナルが培養細胞にも見られるかどうかを数種類のカイコ培養細胞タンパク質を用いて調べた。その結果、非感受性と同様のシグナルを示す細胞系と、感受性品種に近いシグナルを示す細胞系とが見つかった。これら培養細胞にそれぞれのDNVを段階希釈して感染させ、感染後のウイルスDNAをPCRによって検出した結果、良く感染し、増殖するものとそうでないものがあることが解った。これらの事より、ウイルス構造タンパク質に親和性のある宿主タンパク質は存在するが、それは感染を促進すると言うよりもむしろ、感染を防御するような働きのあるタンパク質があるのではないかと考えられた。