卵母細胞の成熟に対するインヒビンファミリーの翻約後修飾の役割の解明

阐明抑制素家族翻译后修饰对卵母细胞成熟的作用

• 批准号: 02J20029
• 负责人: 大沼 克彦
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: National Institute of Agrobiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J20029/
• 关键词: インヒビン; ブタ; 精巣; 卵巣; タンパク質分解酵素; 性成熟; タンパク質精製

インヒビンは、α鎖とβ_A鎖あるいはβ_B鎖によって構成されるヘテロダイマーである。それぞれインヒビンAおよびBと呼ばれるが、これらはタンパク質分解酵素によって分子量10万の前駆体から4.5万、および3万の分子量をとり得ると考えられている。前年度研究の結果が、性雄では成熟に伴って分子量10万と4.5万の前駆体型のインヒビンが減少し、分子量3万の成熟型のインヒビンが増加することが推定された。生殖細胞の成熟に対するインヒビンファミリーの翻訳後修飾の役割の解明の一環として、今年度は性成熟に伴うインヒビンの分子特性の変化を明らかにするために、幼若期(1ヶ月齢)と成熟期(6ヶ月齢)のブタ精巣を試料として、前駆体型と成熟型のインヒビンの精製を試みた。精製には、ウシのインヒビンα鎖に対するアフィニティークロマトグラフィー、SDS-PAGE、および逆相クロマトグラフィーを用いた。逆相クロマトグラフィーからの溶出分画は、インヒビンAおよびBに特異的な蛍光免疫測定法によって測定した。また、インヒビンα鎖モノマーとインヒビンAおよびBの確認は、ウシのインヒビンα鎖、β_A鎖、およびβ_B鎖に対する抗体を用いたウエスタンブロッティングによって実施した。その結果、6ヶ月齢のブタの精巣抽出液からインヒビンのα鎖モノマー(分子量2.6万)とインヒビンA(分子量3万)が精製された。また、少量のインヒビンBの存在も明らかとなった。一方、1ヶ月齢のブタ精巣抽出液からは、インヒビンの前駆体型(分子量4.5万)の存在が明らかとなった。これらの実験の結果から、精巣で産生されるインヒビンの分子量が性成熟に伴い変化することが明らかとなり、インヒビンの分子量の変化が生殖細胞の成熟に影響する可能性が推察された。

The されるヘテロダ ある ヒビ <e:1> と である, the α lock と, the β_A lock ある, the である, the β_B lock によって constitute the されるヘテロダ, the, the である, the である, the β _b, and the によって. そ れ ぞ れ イ ン ヒ ビ ン A お よ び B と shout ば れ る が, こ れ ら は タ ン パ ク qualitative decomposition enzyme に よ っ て molecular weight before 100000 の 駆 body か ら 45000, お よ び の molecular weight 30000 を と り must る と exam え ら れ て い る. が の annual research results before, sex male で は に with mature っ て molecular weight 100000 と 駆 size before 45000 の の イ ン ヒ ビ ン が reduce し type and molecular weight of 30000 の mature の イ ン ヒ ビ ン が raised plus す る こ と が presumption さ れ た. Reproductive cells の mature に す seaborne る イ ン ヒ ビ ン フ ァ ミ リ ー の turn 訳 modification after cutting の の service interpret の link と し て and our は sexual maturity に う イ ン ヒ ビ ン の molecular properties の variations change を Ming ら か に す る た め に, young if 齢 ヶ (1 month) と mature period (6 ヶ 齢) の ブ タ fine 巣 を sample と し て, former 駆 size と mature の イ ン ヒ ビ ン の Refine を test みた. Refined に は, ウ シ の イ ン ヒ ビ ン alpha lock に す seaborne る ア フ ィ ニ テ ィ ー ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー, sds-page, お よ び anti-phase ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー を with い た. Inverse phase ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー か ら の dissolution painting は, イ ン ヒ ビ ン A お よ び B に specific な 蛍 light immunoassay に よ っ て determination し た. ま た, イ ン ヒ ビ ン alpha lock モ ノ マ ー と イ ン ヒ ビ ン A お よ び の confirm は B, ウ シ の イ ン ヒ ビ ン alpha, beta, _A lock lock, お よ び beta _B lock に す seaborne を る antibody with い た ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ に よ っ て be applied し た. そ の results, 6 ヶ 齢 の ブ タ の fine 巣 extract か ら イ ン ヒ ビ ン の alpha lock モ ノ マ ー (molecular weight 26000) と イ ン ヒ ビ ン A molecular weight (30000) が refined さ れ た. Youdaoplaceholder0, a small amount of <s:1> ヒビ ヒビ ヒビ ヒビ B また is present clearly ら となった となった. Side, 1 ヶ month 齢 の ブ タ fine 巣 extract か ら は, イ ン ヒ ビ ン の 駆 size (molecular weight 45000) の exist before が Ming ら か と な っ た. こ れ ら の be 験 の results か ら and fine 巣 で produce さ れ る イ ン ヒ ビ ン の が に maturation with molecular weight い variations change す る こ と が Ming ら か と な り, イ ン ヒ ビ ン の の molecular weight - spheroidized の が reproductive cells mature に す る possibility が push examine さ れ た.

项目成果

Fine mapping of region of rat chromosome 12 close to the aspermia (as) locusand comparison with the human orthologous regions

大鼠 12 号染色体靠近无精子 (as) 位点的区域的精细定位并与人类直系同源区域进行比较

• 发表时间: 2004
• 期刊: Experimental Animal 53
• 作者: J.Noguchi;E.Kobayashi;K.Akiyama;Y.Kawai;M.Ozawa;K.Ohnuma;K.Kikuchi;H.Kaneko;T.Kunieda
• 通讯作者: T.Kunieda