遺伝情報の恒常性維持におけるChk2キナーゼの機能及び悪性リンパ腫瘍との関連解析

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癌抑制遺伝子産物Chk2はDNA損傷時に活性化し、細胞周期チェックポイント機構において重要な役割を担う核内キナーゼである。Chk2はp53やBRCA1など様々な基質をリン酸化し、G2/Mチェックポイント制御だけでなく、アポトーシス・生存といった細胞運命決定に関わるが、その分子機構は未だ不明な点が多い。Chk2の分子基盤を解明するため共役分子を検索した結果、Wip1を同定した。Wip1は核内ホスファターゼであり、DNA損傷時にp53依存的に発現誘導されることが報告されている。また、乳癌などの癌細胞において発現増幅が知られていることから、癌遺伝子産物である可能性が示唆される。今回我々は、Chk2とWip1が核内に共局在し、細胞内において会合することを確認した。Chk2はDNA損傷時にATMなどの分子によって68番目のスレオニンがリン酸化され、そのリン酸化がChk2の活性化に必須であることが知られているが、Wip1はChk2の68番目のスレオニンをin vitroにおいて直接脱リン酸化し、293T細胞にChk2とWip1を共に発現させるとChk2のリン酸化が抑制されることから、細胞内においてもChk2がWip1によって直接脱リン酸化される可能性が高いことを見出した。さらにWip1によって脱リン酸化されたChk2はキナーゼ活性が減弱し、RNAiによるWip1の蛋白発現抑制実験により、Chk2の68番目のスレオニンのリン酸化の持続とキナーゼ活性の持続が確認された。本研究より、DNA損傷時に活性化したChk2のWip1による負のフィードバック機構が存在する可能性が示唆された。