細胞内小胞輸送における高等植物独自の制御機構に関する解析

高等植物胞内囊泡运输独特控制机制分析

• 批准号: 13740466
• 负责人: 竹内 雅宜
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13740466/
• 关键词: 小胞輸送; 植物細胞; Arf GTPase

昨年度までの解析によって,シロイヌナズナのArf1 GTPaseの優性阻害型変異の発現は,植物細胞内のゴルジ体膜タンパク質の局在に対して,タンパク質の種類によって異なる二タイプの効果を及ぼすことが示されていた.一つ目は,変異体との共発現時に,ゴルジ体マーカーAtErd2-GFPを小胞体に局在化させるという効果である.二つ目のタイプは,別のゴルジマーカーであるGFP-AtRer1BとGFP-AtSed5に対しGDP固定型変異と共発現させた場合には,通常のゴルジ局在に影響を与えないが,GTP固定型変異と共発現させた場合には,核周辺部にゴルジ体の集合・密集を引き起こすという効果である.今年度,この現象を詳細に検討するために,小胞輸送の阻害剤であるBrefeldin Aを用いて,各ゴルジマーカーに与える効果を解析した.意外なことに,BFAは,濃度によらず,AtErd2-GFPに対しては小胞体への局在化を引き起こしたが,GFP-AtRer1BとGFP-AtSed5に対しては,通常のゴルジ局在に影響を与えなかった.これらの結果から,Arf1の優性阻害型変異ならびにBFAは,ともに,植物内の小胞体からゴルジ体への順方向輸送ならびにゴルジ体から小胞体への逆方向輸送に対して類似した効果を持つことが明らかになった.現時点では,ゴルジマーカーによって,観察される表現型が異なる点に関して,各マーカーのfolding timeの違い,もしくはマーカーの輸送される経路の違い等が関与しているのではないかと推察している.また,Arf1自身の細胞内局在に関しても,Arf1-GFPを用いた解析からBFA感受性のゴルジ体局在をすることを証明した.以上の結果から,植物のArf1 GTPaseが,植物細胞内の小胞体-ゴルジ体間輸送において必須な機能を果たしていることを明らかにし,今年度,論文発表した.

Yesterday's analysis of the year's までのによって,シロイヌナズナのArf1 GTPase's optimal blocking type is different, and the quality of the body membrane in plant cells is present.に対して, タンパク性の性によってdifferentなる二タイプのeffectを and ぼすことが Showされていた.一つ目は,変variant との同発成时に,ゴルジ体マーカーAtErd2-GFPをThe effect of the small cell body is to change the effect of the body.るGFP-AtRer1B, GFP-AtSed5, GDP fixed type, GTP fixed type.せたoccasion には, core circumference 辺部 にゴルジ体のassemble・intensive をinduced きrise こすというeffect である.Now Year, the detailed phenomenon of the year, the details of the phenomenon, the obstruction of small cell transport, the prevention of small cell transport, Brefeldin A を use いて, each ゴルジマーカーに and えるeffect をanalytic した.Unexpected なことに, BFA は,concentration によらず,AtErd2-GFP に対してはsmall cell body へのlocalization The result of the change is こしたが. f1's superior blocking type is different, it's BFA, and it's small cell body in the plant. The body is transported in the forward direction and the body is transported in the opposite direction. The body is transported in the opposite direction. The effect of the similar thing is the same as the clear one. The current point is the same, and the current point is the same as the original one.って, 観看されるphenotypeがdifferentなるPointに关して,eachマーカーのfolding timeのviolationい,もしくはマーカーの Transportationされる経路のviolationい Wait and so on Arf1's own cell The results of Arf1-GFP analysis and BFA sensitivity analysis are as follows: GTPase is a small cell-to-body transporter in plant cells, which is necessary for the function of GTPase.

项目成果

Masaki Takeuchi, Takashi Ueda, Natsuko Yahara, Akihiko Nakano: "Arf1 GTPase plays roles in the protein traffic between the endoplasmic reticulum and the Golgi apparatus in tobacco and Arabidopsis cultured cells"The Plant Journal. 31・4. 499-515 (2002)

Masaki Takeuchi、Takashi Ueda、Natsuko Yahara、Akihiko Nakano：“Arf1 GTPase 在烟草和拟南芥培养细胞中的内质网和高尔基体之间的蛋白质运输中发挥作用”《植物杂志》31·4（2002）。