体細胞胚のABAによる乾燥耐性獲得機構の解析及びストレス耐性植物の作出

ABA在体细胞胚中获得耐旱性的机制分析及耐逆植物的培育

• 批准号: 13760009
• 负责人: 和久井 健司
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: College of Tokyo University of Agriculture
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13760009/
• 关键词: Brassica napus; Nicotiana tabacum; 不定胚; ストレス耐性; ABA; Lea遺伝子; ME-leaN4; Leaプロモーター; Lea遺伝子プロモーター

本研究は、ABA処理によりナタネ(Brassica napus)小胞子由来胚に誘発される乾燥耐性の機構を明らかにし、ストレス耐性植物を作出することを最終目的とするものであり、本年度は、乾燥耐性能を有するBrassica属植物の小胞子由来胚において発現するLea遺伝子の機能を決定するため、形質転換植物を用いて実験を遂行した。また、これと並行して、Lea遺伝子の発現制御活性の解析を行うため、Lea遺伝子プロモーター-GUS遺伝子を形質転換した植物を用いた、当該プロモーター活性の解析に関する実験を行った。ナタネ花粉由来胚より単離したLea遺伝子、ME-leaN4(以下、leaN4)を35S及びMAT037プロモーターに、センス及びアンチセンス方向に連結した、pMAT::leaN4、pMAT::Anti-leaN4、p35S::leaN4遺伝子を導入した形質転換体タバコ(T1個体)を用い、0.6〜1.5%NaCl、200〜400mMソルビトール及び、5〜8%PEGを含む培地における生育を調査した。その結果、ソルビトール処理区においてわずかながらME-leaN4発現個体における優位な生育が認められた。さらにpMAT::leaN4ならびに、p35S::leaN4遺伝子を導入した形質転換種子を0〜1.5%NaCl条件下に置床した結果、1.2%以上のNaCl条件下において、非形質転換種子と比較し、高い発芽率を示した。また、Leaプロモーター::GUS遺伝子のコンストラクトを導入したタバコ形質転換個体の、ABAおよび種々のストレス条件下におけるGUS発現の有無を調査した結果、10、100mM ABA及び5%NaCl処理により著しいGUS発現が、また400mMソルビトール及び乾燥処理においてもわずかながらGUS発現がみられた。その一方、低温(4℃)によるGUS発現は認められなかった。さらに、pLeaのdeletionクローンを作製し、トランジェントアッセイを試みた結果、各deletionプロモーターの下流に連結したGUS遺伝子における発現誘導に差異がみられた。

In this study, the origin of small cells of the genus Brassica (Brassica napus), the mechanism of drying tolerance, the mechanism of plant tolerance, the most important purpose of this year, the performance of plants of the genus Brassica, the origin of small cells of plants of the genus Brassica, the origin of small cells of plants of the genus Brassica, the origin of small cells of plants of the genus Brassica, the origin of small cells of plants of the genus Brassica, the origin of small cells of plants of the genus Trichoderma. In the shape of the plant, the plant is used to carry out the trail. The activity of the plant is analyzed in the presence of Lea, Lea, GUS, and so on, and the activity is analyzed. The pollen is isolated from the embryo, Lea, ME-leaN4 (below, leaN4), 35s and MAT037. The directions are linked, linked, pMAT::leaN4, pMAT::Anti-leaN4, p35S::leaN4, 0.6~1.5%NaCl, 200mm, 400mm, and so on. 5~8%PEG means to cultivate the earth and give birth to children. The results show that the children in the health care area are suffering from pregnancy and ME-leaN4. Now the child is in a position to have a child. The results of setting up the bed under the condition of 0~1.5%NaCl, more than 1.2% under the condition of pMAT::leaN4, the ratio of non-shape, the rate of buds, and the percentage of buds in the condition of NaCl were higher than that in the condition of NaCl. For example, Lea, 100mM ABA, and 5%NaCl, you can find that there are health problems in GUS under the conditions of real-world, ABA, and 5%NaCl. The results show that there are significant changes in the results, 10, 100mM ABA and 5%NaCl. The results show that there are significant differences in the results of GUS, 400mM and drying conditions. Low temperature (4 ℃), low temperature (4 ℃), low temperature, low temperature (4 ℃), low temperature (4 ℃), low temperature (4 ℃). The results of an attempt to detect errors, the results of an attempt to detect errors, and the results of a link between deletion users and GUS users will show signs of error.

项目成果

Wakui K, Takahata Y: "Isolation and expression of Lea gene in desiccation-tolerance microspore-derived embryos in Brassica spp"PHYSIOLOGIA PLANTARUM. 116. 223-230 (2002)

Wakui K、Takahata Y：“Lea 基因在芸苔属耐干燥小孢子衍生胚胎中的分离和表达”植物生理学。