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抗酸化性を有する食品因子による癌細胞浸潤抑制の機構解析

抗氧化食物因子抑制癌细胞侵袭的机制分析

基本信息

批准号：
13760100
负责人：
三浦豊
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13760100/
关键词：
tumor invasion metastasis motility HGF promoter antioxidant food factor hepatoma

项目摘要

抗酸化性食品因子がラット肝癌細胞の浸潤を抑制すること,その抑制作用が活性酸素種によるHGF遺伝子発現亢進を抑制することにより発揮されていることをすでに確認している。活性酸素種によるHGF遺伝子発現亢進の分子機構を解析するため,最初に内因性の活性酸素種を低下させた際の効果を解析した。低分子抗酸化物質であるNアセチルシステインを添加し,細胞内の過酸化レベルを低下させると,HGF mRNA量,HGF分泌量ともに濃度依存的に減少し,抗酸化性を有する物質がHGF遺伝子発現を抑制することが確認された。更に抗酸化性食品因子の一つであるブドウポリフェノールを添加した際の肝癌細胞におけるHGF遺伝子発現の変化を解析したところ,やはりHGF mRNA量,HGF分泌量ともに有意に減少した。以上の結果は,抗酸化性食品因子はその抗酸化性により,細胞内の過酸化レベルを低下させ,それにより癌細胞運動を抑制し,ひいては癌細胞浸潤を抑制していることを強く示唆している。次に詳細な分子機構解析のためHGF遺伝子のプロモーター領域のクローニングを行った。データベースに登録されている配列をもとにプライマーを設計し,調製したゲノムDNAを鋳型としてPCRにより約600bpのプロモーター領域をクローニングした。得られた配列を確認後,ホタルルシフェラーゼ遺伝子を含むベクター(pGL3-basic vector)に得られたプロモーターを挿入し,肝癌細胞に導入し,活性酸素種処理によるルシフェラーゼ遺伝子発現量の変化を測定した。その結果,今回クローニングした600bpの領域はラット肝癌細胞においてBasalなプロモーターとして作用することは確認できたが,活性酸素種によるHGF遺伝子発現の亢進には関与していないことが明らかとなった。したがって今回クローニングした部分より,更に上流領域が関与している可能性が示唆された。

The anti-acidifying food factor, cell immersion of hepatoma cells, inhibits the growth of hepatoma cells, and the active acid species has an overactive effect on anti-acidifying food factors, such as anti-acidifying food factor, anti-acidifying food factor, hepatoma cell immersion, anti-acidifying food factor, hepatoma cell immersion, anti-acidifying food factor, anti-acidifying The active acid species has been shown to increase the activity of the HGF gene. The molecular mechanism has been analyzed, and the results have been analyzed by the initial analysis of the internal cause of low active acid concentration. Low molecular weight antiacidizing substances, such as low molecular weight antiacidifiers, low molecular weight antiaci The anti-acidizing food factor was added to the anti-acidifying food factor, the amount of HGF mRNA, the amount of HGF secreted intentionally, the amount of HGF secreted, the amount of anti-acidifying food factor, the amount of anti-acidifying food, the amount of anti-acidifying food. The above results showed that the anti-acidizing food factors were resistant to acidification, the intracellular levels were low, the cellular motility of cancer cells was inhibited, and the cell immersion inhibition of cancer cells was strongly expressed. The sub-organization of the HGF organization will analyze the information in the field and the operation in the field. This is the first time that you have registered your information. You will need to set up a device that can be used in the field. You will need to know how to use the DNA device to determine the size of the PCR. You will need to know how to do it in the field. After the correct configuration was obtained, the concentration of pGL3-basic vector was detected. The cells of liver cancer were injected, and the active acids were used. The results show that in the field of 600bp, there are significant differences in the field of liver cancer, liver cancer and liver cancer. This time around, there are some questions about the upper-class domain and the possibility of instigation.