平滑筋細胞においてアセチルコリン神経伝達を担う膜ドメイン

负责平滑肌细胞中乙酰胆碱神经传递的膜结构域

• 批准号: 13770007
• 负责人: 飯野 哲
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770007/
• 关键词: 平滑筋; アセチルコリン; ムスカリン受容体; 神経終末; 膜ドメイン; カベオラ; カベオリン

消化管と気管の平滑筋を対象に、主に免疫細胞化学的手法で平滑筋細胞膜ドメインを解析した。これらの組織はアセチルコリン合成酵素(ChAT)や小胞型アセチルコリントランスポーター(VAChT)の免疫組織化学によりアセチルコリン含有神経終末が豊富であることが確認されている。ムスカリン受容体はM1からM5までサブタイプが存在し、消化管と気管ではM2受容体が多く発現している。消化管においてM2受容体はほぼすべての筋層平滑筋と粘膜内平滑筋に発現したが、その発現量には部位差があった。発現が少なかったのは食道粘膜筋板平滑筋、小腸筋層の最内層平滑筋、小腸粘膜内平滑筋、近位結腸筋層平滑筋であった。食道筋層の横紋筋では発現がなかった。小腸と結腸では平滑筋細胞の他に、カハールの間質細胞と呼ばれる細胞にM2受容体の発現が見られた。平滑筋での発現は細胞周囲に限局しており、免疫電顕の結果、細胞膜の細胞質側に免疫活性が限局し主にカベオラが多数分布する部位と一致した。更に、蛍光2重染色標本を共焦点レーザー顕微鏡を用いて観察した結果、M2受容体の免疫活性はカベオラのマーカー分子であるカベオリンの免疫活性の存在部位と主に一致した。一方、平滑筋細胞には膜関連暗調小体を含む膜ドメインがあるが、そのマーカー分子と考えられるビンクリンの存在する部位とはほとんど一致しなかった。一方、カハールの間質細胞においてはM2受容体の発現が細胞膜のみではなく細胞質内にも瀰漫性に見られ、M2受容体の局在化機構に違いがあると考えられた。気管においても筋層を構成する平滑筋細胞にM2受容体は多量に発現していた。平滑筋細胞における分布様式は消化管筋層平滑筋と同様であった。肺内で気管支と肺動静脈の平滑筋を比較すると気管支壁にのみ発現するのが明瞭に確認できた。

The smooth muscle cell membrane of digestive tract was analyzed by immunocytochemical method. Immunohistochemical analysis of the tissue containing the neuroterminal enzyme (ChAT), microcellular ChAT and VAChT confirmed that the enzyme contained the neuroterminal enzyme. M1, M5, M2, M3, M4, M5, M6, M7, M8, M9, M10, M10, M11, M12, M13, M14, M15, M16, M17, M18, M19, M10, M19, M10, M10, M19, M10, M10, M19, M19, M10, The digestive tract M2 receptor is located in the smooth muscle layer of the digestive tract and in the smooth muscle layer of the mucosa. There are few smooth tendons in the esophageal mucosa, the innermost smooth tendons in the small intestine tendon layer, the smooth tendons in the small intestine mucosa, and the smooth tendons in the proximal colon tendon layer. The esophageal tendon layer and the striated tendons are revealed. The expression of M2 receptors in the interstitial cells of the small intestine was observed. The smooth muscle development is limited to the cellular cycle, the immune response is consistent with the cytoplasmic side of the cell membrane, and the immune activity is limited to the main site. In addition, the immunoactivity of M2 receptor was detected by confocal microscopy. The immunoactivity of M2 receptor was detected by molecular microscopy. A smooth muscle cell contains membrane-related dark regulatory bodies. In one direction, the interstitial cells of the M2 receptor were found to be diffuse in the cytoplasm, and the M2 receptor was found to be localized in the cytoplasm. The smooth muscle cells formed by the smooth muscle layer of the tube are mainly present in the M2 receptor. Smooth muscle cells are distributed in the digestive tract. Smooth muscle cells are distributed in the digestive tract. The smooth muscle of pulmonary artery and vein in pulmonary artery and vein was compared with that in pulmonary artery and vein, and the development of pulmonary artery and vein was confirmed.