ヒト赤血球置き換えSCIDマウスモデルを用いたヒトバベシア症の解析

使用人红细胞替代 SCID 小鼠模型分析人巴贝斯虫病

• 批准号: 13770128
• 负责人: 新井 智
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770128/
• 关键词: Babesia microti; モノクローナル抗体; 抗原変異; 血清疫学調査; 抗体保有率; SCIDマウス

これまでにヒトに感染することが報告されているバベシア原虫にはヨーロッパ大陸にBabesia divergens、米国にB.microtiが報告されている。日本では、1999年に初めてヒトからB.microtiが分離され、日本にもヒトに感染するバベシア原虫が存在することが明らかになった。しかし、バベシア原虫は宿主の免疫を回避し持続感染するため、効果的なワクチン開発が難しく、しかも発症に関する解析がほとんど行われていない。昨年度、モノクローナル抗体を用いた解析で北海道、関東地方、中国地方、四国地方の野ネズミから分離したバベシア原虫の抗原性がそれぞれ異なっていること、抗原性には全く関係しないRibosomal RNA遺伝子の配列および抗原性から日本のB.microtiは大きく2種類に分類されることが明らかになった。そこで今回は、モノクローナル抗体を用いてバベシア原虫の抗原回避メカニズムの再現を試みた。原虫には島根県下の野ネズミから分離した野外分離株を用いた。昨年度作成したモノクローナル抗体を用いて原虫増殖抑制試験を行うと、コントロールに比べ原虫増殖が抑制された。間接蛍光抗体法およびウエスタンブロットで親原虫と抗体存在下で増殖した原虫の抗原性状を比較すると反応性が若干減少していることが明らかになった。現在は、野外分離株よりcDNAライブラリーを作成し、抗体増殖抑制を示したモノクローナル抗体の認識する抗原遺伝子をクローニングするために実験を進めている最中である。上記と平行して、病態および日本におけるB.microti感染の実態を把握するため、日本人のB.microtiに対する抗体保有調査を行いB.microtiが感染の危険性について検索した。その結果、米国ほどではないが日本人もB.microtiに対して抗体を保有していることが確認され、1999年の症例だけでなく診断されていないヒトバベシア症が存在していることが推測された。

This is the first time that we've reported this infection. We've reported this infection. In Japan, in early 1999, B.microti was isolated and infected. The host immune system avoids infection, and the results of infection are analyzed. In the past year, the analysis of antibody use in Hokkaido, Kanto, China and Shikoku regions has been carried out. The antigenicity of wild protozoa isolated from Hokkaido, Kanto, China and Shikoku regions is different. The antigenicity of B. microti isolated from Japan is different. The antigenicity of B.microti isolated from Japan is different. This is the first time that the virus has been detected. The isolate was isolated from the wild and used in the wild. The results showed that the antibody was used to inhibit the proliferation of protozoa. The indirect light antibody method is used to compare the antigenic characteristics of protozoa in the presence of protozoan antibodies. Now, in the field, the cDNA of the isolate is generated, and the antibody proliferation inhibition is shown. Note that B.microti infection status in parallel, pathologically and in Japan is being investigated in B. microti antibody retention studies in Japan. The results showed that the Japanese B.microti antibody remained in existence, and the 1999 case was diagnosed.

项目成果

Arais S, Tsuji M, Kaiho I, Murayama H, Wei Q, Okabe N, Kamiyama T, Ishihara C.: "Retrospective Seroepidemiological Survey for Human Babesiosis at an Area in Japan Where a Tick-Borne Disease is Endemic"Journal of Veterinary Medical Science. 65/3(In press).

Arais S、Tsuji M、Kaiho I、Murayama H、Wei Q、Okabe N、Kamiyama T、Ishihara C.：“日本蜱传疾病流行地区人类巴贝虫病回顾性血清流行病学调查”兽医医学杂志