慢性関節リウマチにおける新規自己抗原:RBP1類似蛋白質の機能解析

类风湿关节炎中的新型自身抗原：RBP1 样蛋白的功能分析

• 批准号: 13770234
• 负责人: 田中 真生
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770234/
• 关键词: 関節リウマチ; 自己抗原; RB; RBP1; クローニング; 慢性関節リウマチ

関節リウマチ(RA)患者滑膜細胞由来cDNA発現ライブラリーよりRA患者関節滑液由来抗体を用いその抗原抗体反応により単離されたRBP1類似蛋白質(Rbik)cDNAは,さらに3'RACE法により完全長cDNAを復元し,全長が4405bpで91kDa(803aa)の新規蛋白をコードしていることがわかった(DDBJ/EMBL/GenbankにAB030181として登録済).その蛋白はRB蛋白と結合し,他の転写因子RB関連蛋白の結合を促す機能を有すると報告されているRB結合蛋白質1(RBP1)とアミノ酸配列において36.5%のホモロジーを有していた.よってこの蛋白を'RBP1 like protein'の略よりRbikと命名した.Rbik遺伝子は滑膜のみならず各種臓器で発現していた.Rbik cDNA導入滑膜細胞株3系統は,野生株およびmockコントロール株3系統と比べ,全て形態の変化は認めなかったが,全て接触抑制下で核酸合成の低下を認めなかった.これよりRbikは細胞増殖や周期に関わる機能を有することが示唆された.さらにBLOCKSプログラムにより蛋白構造を解析した結果,RbikにはAT-rich interaction domain, chromo domain, A+T-hookやTAF homology domain等のDNA結合蛋白に特徴的な構造が認められ,このことからも前述の機能が示唆された.また大腸菌に発現させたN末Rbik蛋白断片を抗原としたイムノブロットでは,24%(7/29)のRA患者血清中に反応する抗体が検出された.現在完全長のRbik蛋白を作製し,それを抗原としてRA患者血清中の自己抗体を解析している.そしてRAにおける抗Rbik抗体の検出と病態との関連を検討すると共に,さらにRbikの機能の解析を進めている.

cDNA from synovial cells of RA patients was generated using antigen-antibody antibodies from synovial fluids of RA patients. The cDNA of RBP1-like protein (Rbik) was reconstructed by 3'RACE method, and the total length was 4405bp. The new protein was 91kDa(803aa). The protein binds to RB protein, and its binding to RB related protein is promoted by its binding to RB protein 1(RBP1), which is reported to have 36.5% of its binding activity. Rbik cDNA was introduced into synovial cell line 3 and wild cell line 3. The whole morphology of RBP1-like protein was transformed into RBP 1-like protein, and nucleic acid synthesis was reduced under total contact inhibition. The Rbik cell growth cycle is related to the function of the Rbik cell cycle. As a result of protein structure analysis of BLOCKS,Rbik has been identified as a DNA binding protein with AT-rich interaction domain, chromo domain, A+T-hook and TAF homology domain. Antibodies against E. coli were detected in 24%(7/29) of RA patients. Now the Rbik protein is fully produced, and the antigen is analyzed in the serum of RA patients. The relationship between the detection and pathogenesis of anti-Rbik antibodies in RA is discussed, and the function of Rbik is analyzed.

项目成果

田中 真生, 三森 経世: "慢性関節リウマチ/診断・治療のup to date:難治性病態と治療"Mebio. 18・12. 97-101 (2001)

田中真央、三森常世：“慢性类风湿性关节炎/最新的诊断和治疗：难治性病理学和治疗”Mebio 18・101（2001）。

三森 経世, 田中 真生: "慢性関節リウマチの新しい自己抗体"炎症と免疫. 10・1. 78-83 (2002)

三森恒世、田中真央：“类风湿性关节炎的新自身抗体”炎症与免疫学10・1（2002）。

三森 経世, 田中 真生: "関節リウマチの新しい自己抗体と対応抗原"日本臨床. 60・12. 2263-2268 (2002)

Tsuneyo Mimori，Mao Tanaka：“类风湿性关节炎的新自身抗体和相应抗原”日本临床60・12（2002）。

田中 真生, 尾崎 承一: "可溶型gp130と慢性関節リウマチ:Soluble gp130 and rheumatoid arthritis"免疫 Immunology Frontier. 11・2. 46-52 (2001)

田中真央、尾崎翔一：“可溶性gp130与类风湿性关节炎”免疫学前沿11・2（2001）。

Tanaka, M., Ozaki, S., et al.: "Potential preventive effects of follistatin-related protein/TSC-36 on joint destruction and antagonistic modulation of its autoantibodies in rheumatoid arthritis"International Immunology. 10・9. 71-77 (2003)

Tanaka, M., Ozaki, S., et al.：“卵泡抑素相关蛋白/TSC-36 对类风湿性关节炎关节破坏及其自身抗体的拮抗调节的潜在预防作用”国际免疫学 10・9。 (2003)